[发明专利]一种脂滴靶向碳点、制备方法及应用

权利要求书

1.一种脂滴靶向的脂溶性碳点的制备方法，其特征在于，步骤如下：以4-（1-哌啶基）苯胺为原料，无水乙醇为溶剂，在高压反应釜中反应，反应后的粗产品用硅胶柱层析法进行纯化、洗脱、旋转蒸发和干燥，得到纯化的荧光碳点。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述4-（1-哌啶基）苯胺溶于无水乙醇的浓度为10 mg/mL。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述高压反应釜反应温度为160 ℃，反应12 h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：洗脱剂采用石油醚和乙酸乙酯。

5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）将4-（1-哌啶基）苯胺溶于无水乙醇中，其混合溶液置于高压反应釜中；

（2）将步骤（1）中的高压反应釜放入烘箱，将混合溶液加热至160℃反应2 h，反应后的产品自然冷却至室温，得到红棕色溶液；

（3）将步骤（2）的粗产品用硅胶柱层析法进行纯化，以不同比例的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂；

（4）将步骤（3）得到碳点溶液进行旋转蒸发和进一步干燥，得到纯化的荧光碳点。

6.权利要求5所述的制备方法制备的荧光碳点，其特征在于：所述荧光碳点为脂滴靶向的脂溶性碳点。

7.权利要求6所述的荧光碳点在超快速和免洗脂滴成像中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述荧光碳点在可视化双酚A引起的非酒精性脂肪肝试剂中的应用。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，具体步骤如下：

（1）称取荧光碳点固体，用溶剂溶解，配置5 mg/mL的碳点储备液；

（2）将10 μg/mL碳点储备液与细胞共同孵育，通过共聚焦显微镜观察碳点进入活细胞的时间；

（3）将10 μg/mL碳点储备液与细胞共同孵育1 min，通过共聚焦显微镜观察无洗涤成像和洗涤后成像的区别；

（4）将脂滴商染BODIPY 493/503与细胞共同避光孵育20 min，然后加入碳点储备液，通过共聚焦显微镜观察碳点在细胞中的分布情况；

（5）将10 μg/mL碳点储备液与用双酚A处理的细胞共同孵育1min，通过共聚焦显微镜观察脂滴变化。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述步骤（2）中细胞为HeLa细胞、HepG2细胞、SMMC-7721细胞、HEK-293细胞、3T3细胞、HL-7702细胞；步骤（5）中双酚A的浓度为20 μM，处理细胞时间为0、12、24、36、48 h。