[发明专利]外周血PD-1/PD-L1预测乳腺癌肿瘤组织中PD-L1水平的方法

说明书

本申请属于肿瘤诊断和治疗技术领域，提供了一种外周血PD‑1/PD‑L1预测乳腺癌肿瘤组织中PD‑L1水平的方法以及相应试剂的应用，包括检测循环T淋巴细胞中PD‑1和/或PD‑L1的表达水平，以及基于循环T淋巴细胞中PD‑1和/或PD‑L1的表达水平预测肿瘤组织中PD‑L1水平的步骤。本申请的研究结果表明乳腺癌患者的临床病理状态可能影响外周血中PD‑L1阳性T淋巴细胞水平；外周血中PD‑1/PD‑L1阳性淋巴细胞检测有评估乳腺癌组织中PD‑L1表达性质的能力，表明血液样本中淋巴细胞表面的PD‑1/PD‑L1水平有望在临床上替代病理组织成为PD‑L1状态评价的指标。

技术领域

本申请属于肿瘤诊断和治疗技术领域，具体地，本申请提供了一种外周血PD-1/PD-L1预测乳腺癌肿瘤组织中PD-L1水平的方法，其特征在于包括检测循环T淋巴细胞中PD-1和/或PD-L1的表达水平，以及基于循环T淋巴细胞中PD-1和/或PD-L1的表达水平预测肿瘤组织中PD-L1水平的步骤。

背景技术

近年来全球范围内乳腺癌发病率呈上升趋势，新型的治疗手段也在不断地探索中。PD-1及PD-L1抑制剂作为免疫治疗重大突破，最先获批于非小细胞肺癌及黑色素瘤等的治疗，能够改善患者的中位无进展生存期及总生存期，并逐渐覆应用其他实体或血液系统肿瘤。由于三阴型乳腺癌对抗PD-1/PD-L1药物有更好的反应性，因此PD-1/PD-L1抑制剂相关临床实验更集中于这一分子分型的肿瘤。这一亚型的肿瘤中以病理免疫组化方式测得的PD-L1阳性患者比例为38-78％，这种差异可能与所选取人群的人种、既往的治疗经历及转移情况等相关。此外，研究表明PD-1/PD-L1表达水平不仅与肿瘤直径、淋巴结转移情况及预后等临床病理学特点存在关联，而且可以用于预测患者对PD-1/PD-L1抑制剂的反应。

现阶段临床医生多通过治疗前肿瘤标本中PD-1/PD-L1的表达来评定是否应用PD-1阻断药物。在乳腺癌中是以瘤周浸润免疫细胞中PD-L1阳性细胞数量≥1％作为使用阿特朱单抗的指征。但忽略了肿瘤组织中的PD-1/PD-L1水平在治疗中不断变化使肿瘤对药物的反应性改变这一事实，因此经常需要重复组织活检以随时调整用药。重复组织活检创伤较大，因此研究者们不断探索新的具有预测作用的生物标志物。外周血以其便捷的获取方式和低廉的成本备受关注。有研究表明肺癌中PD-L1阳性循环T淋巴细胞的水平与预后相关。也有学者在乳腺癌中做了相似研究，发现乳腺癌TIL中LAG3和PD-1双阳性T淋巴细胞的比例与分子分型相关，而PBL中此类T淋巴细胞则无意义。此外，在正常乳腺与原发浸润性乳腺癌外周血单核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中发现双表达PD-1和CTLA-4的CD4+T淋巴细胞数量无统计学差异，但在TIL中二组人群之间存在差异。

发明内容

综上所述，如果能以外周血中某些指标的检测替代组织病理检测，将增加患者治疗过程中的依从性、简化临床诊疗工作，同时在不方便获取肿瘤组织标本时也能够及时掌握患者PD-L1状态。本申请评估了PD-1/PD-L1阳性循环T淋巴细胞水平替代病理组织免疫组化对患者PD-L1表达状态评定的可行性。

一方面，本申请提供了一种外周血PD-1/PD-L1预测乳腺癌肿瘤组织中PD-L1水平的方法，其特征在于包括检测循环T淋巴细胞中PD-1和/或PD-L1的表达水平，以及基于循环T淋巴细胞中PD-1和/或PD-L1的表达水平预测肿瘤组织中PD-L1水平的步骤。

进一步地，所述方法为非诊断方法。

进一步地，所述肿瘤为乳腺癌。

进一步地，所述检测检测循环T淋巴细胞中PD-1和/或PD-L1的表达水平通过流式细胞术进行。

进一步地，检测样本来源为Luminal分型中Luminal A型及HER-2过表达型对象。

进一步地，检测循环T淋巴细胞表面PD-1的水平。