[发明专利]一种禾谷镰孢分生孢子快速形成方法有效
申请号: | 202110390506.8 | 申请日: | 2021-04-12 |
公开(公告)号: | CN113061565B | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
发明(设计)人: | 李永刚;孙磊;王爽;张雪;刘金鑫 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学;黑龙江省农业科学院土壤肥料与环境资源研究所 |
主分类号: | C12N3/00 | 分类号: | C12N3/00;C12R1/77 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 王敏 |
地址: | 150036 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 禾谷 分生孢子 快速 形成 方法 | ||
1.一种禾谷镰孢分生孢子快速形成方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)液体培养基质的制备:用自来水配制浓度为0.9%-1.5%的盐水,pH值调整为8-10;分装,每100 ml三角瓶装液量为15 ml,121℃灭菌30 min,冷却后备用;
(2)禾谷镰孢的扩繁:将禾谷镰孢转移至PDA培养基上培养,备用;
(3)禾谷镰孢产孢的培养:挑取7-8个步骤(2)扩繁的禾谷镰孢的菌蝶转移到步骤(1)灭菌后的三角瓶中培养,培养温度28-30℃;培养时间96 h-120 h;初始pH为8-10;光照,可见光150-200 lux;振动速度150-180 rpm;
(4)禾谷镰孢分生孢子悬浮液的获得及计数:培养96 h-120 h后,用双层纱布过滤,获得分生孢子悬浮液,计数。
2.根据权利要求1所述的一种禾谷镰孢分生孢子快速形成方法,其特征在于,步骤(1)所述盐水的浓度为0.9%。
3.根据权利要求1所述的一种禾谷镰孢分生孢子快速形成方法,其特征在于,步骤(2)所述培养的条件为26-28℃黑暗培养8-10天。
4.根据权利要求1所述的一种禾谷镰孢分生孢子快速形成方法,其特征在于,步骤(3)所述菌蝶的直径为0.7 cm。
5.根据权利要求1所述的一种禾谷镰孢分生孢子快速形成方法,其特征在于,步骤(4)所述计数的方法为:取5μl分生孢子悬浮液在玻璃载玻片上涂一条线,在光学显微镜下计数;分生孢子悬浮液的浓度为:5 μl分生孢子悬浮液中的孢子数/ 5×103,浓度的单位为个/ ml。
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