[发明专利]一种预防和控制人乳头瘤病毒感染（HPV）的活性生物蛋白的制备方法

说明书

本发明涉及一种预防和控制人乳头瘤病毒感染(HPV)的活性生物蛋白的制备方法，包括以下步骤：1、取活性蛋白或活性肽溶于超纯水中，配置成浓度为0.05‑0.2g/mL的活性蛋白溶液；2、取酸酐或酸酐衍生物，加入水，配置成质量分数为10‑50％的酸酐水溶液；3、配置磷酸盐缓冲溶液，用盐酸调节溶液pH值；4、取活性蛋白溶液，将其加入到磷酸盐缓冲溶液中，搅拌均匀后，将酸酐水溶液缓慢倒入活性蛋白溶液中，30‑40℃下搅拌1h以上；5、将步骤4的溶液倒入透析袋中，之后放入磷酸盐缓冲溶液中透析；6、用注射器取步骤5的溶液，微孔滤膜过滤除菌；7、冷冻干燥后，冷藏保存。采用该方法制备的活性生物蛋白能够预防和控制HPV的病毒、并阻止病毒感染。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种预防和控制人乳头瘤病毒感染(HPV)的活性生物蛋白的制备方法。

背景技术

人乳头瘤病毒持续感染属于宫颈比较常见的疾病类型。据不完全统计，全球正常女性宫颈HPV感染率可达到13％左右，而国内稍高于该值，其中性活跃女性中生殖道HPV感染甚至能超过80％。大多数情况下，HPV感染后可经机体免疫调节清除，但约有10％左右HPV会持续存于宫颈，这类持续感染是导致宫颈癌最为主要的一个原因。基于此，尽早诊断与治疗宫颈HPV持续感染十分关键。

目前，能够治疗或预防人乳头瘤病毒感染的产品并不少，但这些产品的治疗效果一般，无法彻底阻断HPV病毒感染。

发明内容

本发明的目的在于提供一种预防和控制人乳头瘤病毒感染(HPV)的活性生物蛋白的制备方法，采用该方法制备的活性生物蛋白能够预防和控制HPV的病毒、并阻止病毒感染。

为实现上述目的，本发明是采用如下技术方案实现的：

一种预防和控制人乳头瘤病毒感染(HPV)的活性生物蛋白的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、取活性蛋白或活性肽溶于超纯水中，配置成浓度为0.05-0.2g/mL的活性蛋白溶液；

步骤2、取酸酐或酸酐衍生物，加入水，配置成质量分数为10-50％的酸酐水溶液；

步骤3、配置磷酸盐缓冲溶液，用盐酸调节溶液pH值；

步骤4、取活性蛋白溶液，将其加入到磷酸盐缓冲溶液中，搅拌均匀后，将酸酐水溶液缓慢倒入活性蛋白溶液中，30-40℃下搅拌1h以上；

步骤5、将步骤4的溶液倒入透析袋中，之后放入磷酸盐缓冲溶液中透析；

步骤6、用注射器取步骤5的溶液，微孔滤膜过滤除菌；

步骤7、冷冻干燥后，冷藏保存。

作为本发明的优选，所述活性蛋白包括：活性动物胶原蛋白、重组人源胶原蛋白、抗菌蛋白；所述活性肽包括：抗菌肽Nal-P-113、抗菌肽PL-5。

作为本发明的优选，所述酸酐或酸酐衍生物包括：琥珀酸酐、琥珀酸酐衍生物、马来酸酐、马来酸酐衍生物、3-羟基-邻苯二甲酸酐、乙酸酐。

作为本发明的优选，磷酸盐缓冲液配置方式为：取7.9g氯化钠、0.2g氯化钾、0.24g磷酸二氢钾和1.8g磷酸氢二钾，溶于800mL超纯水中，用盐酸调节溶液pH值至7.0，最后加超纯水定容至1L。

本发明的优点和积极效果：采用本发明提供的方法所获得的抗HPV活性生物蛋白经正负电荷作用破坏HPV蛋白构象，使HPV失活。同时，该活性生物蛋白也可与HPV衣壳蛋白的L1的C端和L2肽段的N端的正电荷区域结合，阻断病毒侵入宿主细胞，从而达到阻断HPV感染的目的。

附图说明

图1是GD蛋白对HPV6的抑制作用图。

具体实施方式