[发明专利]一种可控环境下水稻纹枯病抗性的苗期鉴定方法

说明书

本发明公开了一种可控环境下水稻纹枯病抗性的苗期鉴定方法，属于植物抗病鉴定技术领域，包括以下步骤：S1、菌种准备：将纹枯病菌株放置在PDA(土豆葡萄糖琼脂)培养基，其中添加0.005％(W/V)四环素，活化培养3‑5天，获得菌丝，待用；S2、扩大培养：将配置好的PDA培养基灭菌后，在超净工台中倒入塑料培养皿，凝固待用，然后将菌丝饼接种至PDA培养基中心，待其表面长满菌丝后，待用；S3、待鉴定水稻材料的准备：挑选待鉴定材料和抗感对照品种的饱满种子浸种催芽，待种子破胸露白；S4、将催芽后的种子播于育秧盘，2叶1心期进行间苗；S5、准备接种鉴定平台；S6、3‑4叶期接种；S7、当80％感病对照品种Lemont的病斑生长高度/株高相对值达到1，鉴定纹枯病抗性。

技术领域

本发明属于植物抗病鉴定技术领域，具体涉及一种可控环境下水稻纹枯病抗性的苗期鉴定方法。

背景技术

纹枯病(Sheathblight)，也称“花脚病”，由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)引发的水稻三大主要世界性病害之一，严重影响水稻的产量和品质(桑海旭，等.水稻纹枯病对水稻产量及米质的影响.北方水稻，2012,43(1):10-13)。随着高产、矮秆、多蘖、耐肥品种的应用推广，种植密度提高以及施氮量增加，水稻纹枯病的危害日趋严重。该病发生面积广，危害程度高，已上升为我国南方稻区的第一大病害(张偕正，等.我国南方稻区水稻骨干亲本纹枯病抗性鉴定与分析.植物保护，2008,34(1):45-48)，一般造成水稻产量损失10％-30％，严重时可达50％。据统计，2006、2007年，纹枯病导致我国水稻分别损失109.66万吨和109.27万吨(曾宇翔，等.水稻纹枯病抗性基因定位及抗性资源发掘的研究进展.中国水稻科学，2010,24(5):544-550)。因此，挖掘水稻纹枯病抗性基因，培育抗纹枯病新品种是水稻纹枯防治的最环保有效途径，是水稻抗纹枯病遗传育种和分子生物学领域持续关注的热点。

培育并推广应用抗纹枯病品种是水稻纹枯病防治的重要途径，但是前提是需要正确精准评价现有水稻种质的纹枯病抗感表型，并鉴定其中的数量抗性基因，从而将其应用于纹枯病抗性育种中(曾宇翔，等.水稻纹枯病抗性基因定位及抗性资源发掘的研究进展.中国水稻科学，2010,24(5):544-550)。目前供研究利用的水稻抗纹枯病材料主要是少数抗性较高的种质或品种，如Jasmine 85、特青、Tetep、LSBR-5、LSBR-33、YSBR1和窄叶青8号等(王玲，等.对中国南方部分籼型杂交水稻纹枯病抗性的评价.作物学报，2011,37(2):263-270；左示敏，等.水稻不同类群品种间的纹枯病抗性评价和抗病新种质筛选.植物病理学报，2014,44(6):658-670)，抗性水稻种质十分有限。水稻对纹枯病的抗性受多基因控制，导致仅依赖少数抗病品系难以培育优异的抗病新品种(Zuo S M,et al.Comparison andconfirmation of quantitative trait loci conferring partial resistance to ricesheath blight on chromosome 9.Plant Disease,2014,98(7):957-964)，应进一步加强资源的搜集与鉴定。