[发明专利]一种细胞色素P450 46A1酶的特异性抑制剂及其应用

说明书

本发明的目的在于提供一种细胞色素P450(CYP)46A1的特异性抑制剂及其应用，其可用于CYP 46A1的表型研究，包括鉴定CYP46A1是否参与特定内源性类固醇物质的代谢反应及其贡献率。体外活性测定发现该化合物抑制CYP46A1酶的IC₅₀值在26纳摩尔左右，但对其它CYP亚型的IC₅₀值大于100微摩，具有显著的抑制选择性。提示该化合物在细胞色素P450代谢研究及鉴定CYP 46A1参与内源性类固醇物质代谢贡献率的使用中具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种细胞色素P450 46A1酶的高选择性抑制剂及其应用。

背景技术

细胞色素P450(Cytochrome P450,CYP)超家族包含了机体内最重要的药物代谢酶，属于单氧酶的一类。细胞色素P450 46A1酶(CYP46A1)是一种神经元专属的细胞色素P450酶，它主要分布于正常脑组织的神经元和星形胶质细胞中，少量分布于神经视网膜上(Proc Natl Acad Sci U S A,1999；96:7238)。CYP46A1参与脑内胆固醇氧化反应，将大脑内的胆固醇代谢为24-羟基胆固醇(24-OHC)，24-OHC在正常生理条件下进入体循环，是胆固醇消除和稳态稳定的主要途径(Current opinion in lipidology,2001；12:105)，CYP46A1酶被认为是脑胆固醇转化为24-OHC这一过程的限速酶。胆固醇在维持中枢神经系统的结构和功能中发挥着重要作用，正常情况下胆固醇不易透过血脑屏障，脑内胆固醇为原位生物合成，脑内胆固醇增加可导致淀粉样蛋白水平增加，因此，胆固醇的氧化代谢是保证脑内外转运动态平衡的重要保障(Molecular psychiatry,2003；8:635)。截至目前为止，CYP46A1介导的代谢反应除了胆固醇-24-羟化反应外，还有睾酮-16β羟化反应(Front MolNeurosci.2020；13:568641.)。

越来越多的研究表明，CYP46A1酶与各种神经退行性疾病如阿尔兹海默病(AD)、帕金森病(PD)和亨廷顿氏病(HD)等密切相关。已有报道表明，与正常人相比，神经退行性疾病患者血浆中的24-羟化胆固醇水平明显升高，因此，24-羟化胆固醇也被认为是神经退行性病变的潜在生物标记物(Neuroreport,2000；11:1959)。然而，需要强调的是，24-羟基胆固醇升高的程度在不同的患者中可能随时间而改变。因此，需要在更多的AD人群中进行进一步的纵向研究，以评估24-羟基胆固醇是否是早期检测AD及其进展的合适生化标志物(Journal of lipid research,2000；41:195)。有关实验结果证实了AD患者血浆24-羟基胆固醇水平取决于疾病的严重程度，轻度痴呆患者血浆24-羟基胆固醇水平升高，重度痴呆患者血浆24-羟基胆固醇水平降低(Neuroreport,2000；11:1959)。一方面，诱导CYP46A1过度表达时，可以减少淀粉样沉积，从而减轻AD模型动物的认知功能障碍症状(Humanmolecular genetics,2015；24:5965)。通过用低剂量的抗艾滋病毒药物依法韦伦治疗快速淀粉样变性模型5XFAD小鼠，低剂量的依法韦伦增强了CYP46A1的活性,降低了5XFAD小鼠大脑皮层和下丘的淀粉样蛋白负荷和小胶质细胞活化，以及淀粉样前体蛋白的蛋白水平，改善了小鼠的空间记忆(EMBO molecular medicine,2020；12:e10924)。另一方面，抑制CYP46A1活性则可以减少癫痫发作频率(The Neuroscientist 2016；2:132)，武田制药公司开发的TAK-935药物评估对CYP46A1的抑制作用，旨在评估TAK-935作为一种辅助疗法在儿童发育性或癫痫性脑病患者中的疗效、安全性和耐受性(Neurotherapeutics 2019；16:635)。

因此无论是激活或是抑制CYP46A1酶活性都具有潜在的临床治疗价值，CYP46A1无疑将成为一个新的研究靶点，开发CYP46A1酶的激活剂或抑制剂也将产生深远的临床意义。

发明内容