[发明专利]根瘤土壤杆菌及其固定化菌体和用于降解阿奇霉素的方法

权利要求书

1.一种固定化菌体，其特征在于，包括根瘤土壤杆菌，以及包裹所述根瘤土壤杆菌的海藻酸钠；

所述根瘤土壤杆菌已于2020年5月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19805。

2.根据权利要求1所述一种固定化菌体，其特征在于，根瘤土壤杆菌的16SrDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.权利要求1所述固定化菌体的获得方法，其特征在于，配制海藻酸钠溶液，加热溶解；

配制含CaCl₂溶液作为交联剂；

将海藻酸钠和交联剂灭菌后，冷却；

将根瘤土壤杆菌或降解菌剂离心所得湿菌体加入到海藻酸钠溶液中，混匀，吸取混合液，均匀滴至交联剂中，进行交联，然后清洗，得到固定化菌体。

4.根据权利要求3所述固定化菌体的获得方法，其特征在于，配制5％海藻酸钠溶液，加热溶解；配制含4％CaCl₂作为交联剂；将海藻酸钠和交联剂灭菌后，冷却至手背感觉不烫；将所述根瘤土壤杆菌或所述降解菌剂离心所得湿菌体加入到海藻酸钠中，混匀，用注射器吸取混合液，均匀滴至交联剂中，在4℃冰箱交联一点时间后，用无菌水清洗小球后至4℃冰箱中备用。

5.根据权利要求3所述固定化菌体的获得方法，其特征在于，所述降解菌剂是基于所述根瘤土壤杆菌获得，将所述根瘤土壤杆菌经种子培养、发酵培养后得到所述降解菌剂。

6.根据权利要求5所述固定化菌体的获得方法，其特征在于，进行种子培养所需的种子培养基为：牛肉浸出膏5g，蔗糖5g，MgSO₄.7H₂O 0.24g，水l L，pH7.0，灭菌后倒斜面备用。

7.根据权利要求5所述固定化菌体的获得方法，其特征在于，进行发酵培养所需的发酵培养基为：牛肉浸出膏5g，酵母浸出膏1g，蛋白胨5g，可溶性淀粉3g，蔗糖3g，MgSO₄.7H₂O0.24g，ZnSO₄.7H₂O 0.24g，水l L，pH7.0，灭菌后备用。

8.根据权利要求5所述固定化菌体的获得方法，其特征在于，所述降解菌剂的获得方法为：将所述根瘤土壤杆菌经种子培养后所得种子液按体积5％接种量接种到发酵培养基中，于28-35℃、搅拌下培养24～48小时得到降解菌剂。

9.一种根瘤土壤杆菌或降解菌剂或固定化菌剂在降解阿奇霉素中的应用，其特征在于，

所述根瘤土壤杆菌已于2020年5月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.19805；

所述降解菌剂是基于所述根瘤土壤杆菌获得，将所述根瘤土壤杆菌经种子培养、发酵培养后得到所述降解菌剂；

所述固定化菌体包括根瘤土壤杆菌，以及包裹所述根瘤土壤杆菌的海藻酸钠。

10.根据权利要求9所述应用，其特征在于，将所述根瘤土壤杆菌或所述降解菌剂或所述固定化菌剂添加到含有阿奇霉素的样品中，以所述根瘤土壤杆菌或所述降解菌剂或所述固定化菌剂中的湿菌体计，阿奇霉素与所述根瘤土壤杆菌或所述降解菌剂或所述固定化菌剂按照重量比1:3～1:7的比例，30℃、150～220rpm降解24～36小时。