[发明专利]一种1-NEA对映异构体过量率的测定方法

说明书

本发明涉及一种1‑NEA对映异构体过量率的测定方法，其包括以下步骤，（1）衍生化，（2）分离检测。本发明采用(S)‑萘普生酰氯为衍生化试剂与1‑NEA进行快速衍生化反应，然后使用普通反相HPLC‑UV对(S)‑萘普生酰基‑1‑NEA进行定性分析、定量分析、对映异构体过量率的测定。该方法简单、快捷、有效且成本低廉。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种1-NEA对映异构体过量率的测定方法。

背景技术

1-萘乙胺(1-NEA)是新型口服拟钙剂盐酸西那卡塞重要的手性中间体，而(R)-1-NEA是(R)-盐酸西那卡塞唯一的手性中心引入源，因此，1-NEA的对映异构体过量率的测定对于制备高光学纯度盐酸西那卡塞具有重要的理论意义与实际意义。

手性色谱柱分析法是测定1-NEA对映异构体过量率的主要方法，此方法结果准确、可靠。张峰等(华西药学杂志,2014,29(01):75-76)采用Daicel Chirlcel OJ-H(250mm×4.6mm,5μm)手性色谱柱，流动相为95％正己烷+5％乙醇+0.1％乙醇胺，流速为1.0mL/min，紫外吸收波长设定在222nm，柱温为25℃，获得1-NEA的对映异构体过量率；Pan等(TheJournal of Organic Chemistry,2018,83(19):11502-11509)采用Daicel Chiralcel OD-H column(250mm×4.6mm,5μm)手性柱测定1-NEA的手性纯度，使用Agilent 1100HPLC仪器，流动相为90％己烷+10％异丙醇，流速为0.8mL/min，紫外吸收波长设定在285nm，获得对映体过量测量值。

手性色谱柱价格约1.5-2万元左右，价格昂贵，同时手性色谱柱使用条件苛刻、寿命短等，相比之下采用非手性色谱柱测定操作简便且成本低廉。在以往的报道中，Calmes等(Tetrahedron Asymmetry,1993,4(12):2437-2440)采用Marfey试剂作为手性衍生试剂与1-NEA进行衍生化反应，乙腈和水作为流动相，Jun等采用DBD-顺式-4-羟基-L-脯氨酸、DBD-反式-4-羟基-L-脯氨酸等作为手性衍生试剂与1-NEA进行衍生化反应，甲醇和水作为流动相，在ULTRON VX-ODS(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱进行测定，前者所测得衍生产物的保留时间为20min左右，后者为40min左右。以上两种方法经过衍生化反应后，使用非手性色谱柱进行对映异构体过量率的测定，虽然节约了检测成本，但衍生产物的保留时间过长。Mochizuki等(Analytica Chimica Acta,2013,773:76-82)采用L-PGA作为手性衍生试剂，在UPLC上使用乙腈和水作为流动相，衍生产物的保留时间分别为8.58min和9.03min，虽然缩短了衍生产物的保留时间，但是衍生化过程使用EDC和HOBt作为缩合剂，存在原子经济性较差的问题。

现有专利技术中也有披露过衍生化过程，比如专利号ZL201610043272.9、ZL201610043273.3、ZL201610043277.1和ZL201610043270.X中披露了3-氨基哌啶和2-氨基丁醇的对映异构体的HPLC分离检测方法，但是由于目标底物不同，相应的特定的手性衍生试剂是技术关键，手性试剂的选择并不是显而易见或者推导出来的，原因有以下几点：(1)一些手性试剂不易购买，难以合成，如在先专利用到的手性衍生试剂(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯不易购买，若先自制合成(R)-(+)-1-苯基乙磺酸，再经过氯代反应制得手性衍生试剂(R)-(+)-1-苯基乙磺酰氯，不仅增加了检测成本，而且大大增加了检测时间，过程不再具有便捷性。

(2)一些化合物如(S)-COXA-Osu、OTPTHE等虽然可直接用作手性衍生试剂，但其价格较为昂贵，增加了检测成本。