[发明专利]一种斑玉蕈强启动子及其应用

说明书

本发明公开了一种斑玉蕈强启动子及其应用，其中，所述启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明选择并设计的HmGPD启动子高效地驱动外源基因在斑玉蕈中表达，为通过遗传方法改良符合生产需求和消费者喜爱的斑玉蕈新品种奠定基础，具有良好的市场应用前景。

技术领域

本发明属于启动子技术领域，具体涉及一种斑玉蕈强启动子及其应用。

背景技术

斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)又名蟹味菇、鸿喜菇或海鲜菇等，在分类学上隶属于担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲(Agaricomycetes)、伞菌目(Agaricales)、离褶伞科(Lyophyllaceae)、玉蕈属(Hypsizipus Singer)。斑玉蕈自二十世纪八十年代引入我国开始栽培后，已经从栽培条件、栽培原料、药理作用和营养价值等多方面展开研究。通过现代遗传学方法改良品种是斑玉蕈产业发展的迫切需求，而分子生物学工具的缺乏是斑玉蕈遗传研究中的瓶颈。启动子作为控制基因转录的重要顺式元件，在基因表达中起着至关重要的作用，在遗传转化实验中选择合适的启动子是提高外源基因表达水平的关键。

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GPD)是糖酵解途径中的关键酶之一，催化NADH依赖性的二羟丙酮磷酸转化为甘油-3磷酸。由于功能保守，GPD基因在人类、动物、植物和真菌中广泛存在。

因此，开发一种可用于高效驱动外源基因增强表达的启动子，从而为斑玉蕈的遗传转化研究提供重要工具，是有待解决的技术问题。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

作为本发明其中一个方面，本发明提供一种斑玉蕈强启动子，其中：所述启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

作为本发明所述的斑玉蕈强启动子的一种优选方案：所述启动子，其扩增引物序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。

作为本发明的另一个方面，本发明提供所述的斑玉蕈强启动子在斑玉蕈中表达外源基因中的应用。

本发明的有益效果：本发明在多种基因启动子中经过大量研究筛选，优选了HmGPD基因并设计出HmGPD启动子，能够高效地驱动外源基因在斑玉蕈中表达，为通过遗传方法改良符合生产需求和消费者喜爱的斑玉蕈新品种奠定基础，具有良好的市场应用前景。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：

图1为斑玉蕈转化质粒HmGPD-p021的PCR引物示意图；

图2为斑玉蕈转化质粒CaMV35S-p012的PCR引物示意图；

图3为RT-PCR检测CaMV35S-p012转化子中外源基因的表达和内含子的切割；

图4为RT-PCR检测HmGPD-p021转化子中外源基因的表达；

图5为RT-PCR检测HmGPD-p021转化子中内含子的切割；

图6为CaMV35S-p012和HmGPD-p021转化子花青素合成基因的相对表达量。

具体实施方式

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。