[发明专利]一种具有抗氧化和ACE抑制功能的大豆蛋白肽及其制备方法

权利要求书

1.一种大豆蛋白肽，其特征在于，其制备方法包括：以大豆分离蛋白为原料，经热变性处理后，在进行两步酶解制得酶解物；

所述两步酶解中，第一步酶解使用的酶为酶活为50,000-500,000U/g的碱性蛋白酶，第二步使用的酶为复合蛋白酶，所述复合蛋白酶为酶活为100,000-650,000U/g的中性蛋白酶和酶活为80,000-250,000U/g风味蛋白酶；

所述大豆蛋白肽含有质量百分含量≥50％的功能肽，所述功能肽的序列如SEQ IDNO.1～3任一所示。

2.根据权利要求1所述的大豆蛋白肽，其特征在于，所述复合蛋白酶中，中性蛋白酶和风味蛋白酶的质量之比为1-2:1。

3.根据权利要求1或2所述的大豆蛋白肽，其特征在于，所述第一步酶解中，以原料蛋白的质量为基准，碱性蛋白酶的用量为0.5-1.0％，酶解条件为pH为8～10、40～70℃酶解30～60min；

所述第二步酶解中，以原料蛋白的质量为基准，复合蛋白酶的用量为1.0-2.0％，酶解条件为40～70℃酶解3-7h。

4.根据权利要求1或2所述的大豆蛋白肽，其特征在于，所述热变性处理包括：将大豆分离蛋白与水混合后，在90～110℃下保温30-60min。

5.根据权利要求3所述的大豆蛋白肽，其特征在于，所述热变性处理包括：将大豆分离蛋白与水混合后，在90～110℃下保温30-60min。

6.根据权利要求1、2、5中任一项所述的大豆蛋白肽，其特征在于，所述制备方法还包括：从所述酶解物中分离得到分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液，而后进行目标肽的分离；

所述目标肽的分离包括：

将所述分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液经SephadexG-15凝胶分离，洗脱液为去离子水，洗脱峰在280nm下进行检测，收集第2个洗脱峰；再用RP-HPLC反相高效液相色谱进行分离，分离条件如下：采用C18色谱柱，以含0.1％TFA的水溶液为流动相A，含0.1％TFA的乙腈溶液为流动相B，采用梯度洗脱进行分离：0-5min，5％的流动相B；5-45min，5-45％的流动相B；45-55min，45-5％的流动相B，流速为1mL/min；收集9～13分钟分离的蛋白肽溶液。

7.根据权利要求3所述的大豆蛋白肽，其特征在于，所述制备方法还包括：从所述酶解物中分离得到分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液，而后进行目标肽的分离；

所述目标肽的分离包括：

将所述分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液经SephadexG-15凝胶分离，洗脱液为去离子水，洗脱峰在280nm下进行检测，收集第2个洗脱峰；再用RP-HPLC反相高效液相色谱进行分离，分离条件如下：采用C18色谱柱，以含0.1％TFA的水溶液为流动相A，含0.1％TFA的乙腈溶液为流动相B，采用梯度洗脱进行分离：0-5min，5％的流动相B；5-45min，5-45％的流动相B；45-55min，45-5％的流动相B，流速为1mL/min；收集9～13分钟分离的蛋白肽溶液。

8.根据权利要求4所述的大豆蛋白肽，其特征在于，所述制备方法还包括：从所述酶解物中分离得到分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液，而后进行目标肽的分离；

所述目标肽的分离包括：

将所述分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液经SephadexG-15凝胶分离，洗脱液为去离子水，洗脱峰在280nm下进行检测，收集第2个洗脱峰；再用RP-HPLC反相高效液相色谱进行分离，分离条件如下：采用C18色谱柱，以含0.1％TFA的水溶液为流动相A，含0.1％TFA的乙腈溶液为流动相B，采用梯度洗脱进行分离：0-5min，5％的流动相B；5-45min，5-45％的流动相B；45-55min，45-5％的流动相B，流速为1mL/min；收集9～13分钟分离的蛋白肽溶液。