[发明专利]一种微生物菌剂

权利要求书

1.一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、将侧孢芽孢杆菌、土壤短芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌株分别固体活化培养后，制得浓度均为2-3×10^8CFU/ml的三种菌悬液；

S2、制备需要一级种子培养基、二级种子培养基与发酵培养基；

S3、将三种菌悬液分别以体积百分数为3-7％的接种量接种至一级种子培养基，培养得到浓度均为2-4×10^10CFU/ml的三种一级种子菌悬液；

S4、将三种一级种子菌悬液以等体积混合，然后以体积百分数为1-3％的接种量转接至二级种子培养基，培养得到混合菌浓度为1-5×10^11CFU/ml的二级种子混合菌悬液；

S5、将二级种子混合菌悬液按体积百分数为1-6％的接种量转接至发酵培养基；

S6、将接种后的二级种子混合菌悬液发酵至芽孢浓度为1-5×10^12CFU/ml、芽孢数占所述发酵菌液总菌数的80％以上，装瓶后得到微生物菌剂。

2.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤S2中的一级种子培养基成分重量份包括：谷物粉20-28份、酵母提取物5-8份、氯化钠6-10份和蒸馏水1000份，且将一级种子培养基的pH控制在7.1-7.5。

3.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤S2中的二级种子培养基成分重量份包括：玉米粉20-28份、酒糟粉8-12份、花生粕粉4-6份、氯化钠5-7份和蒸馏水1000份，且将二级种子培养基的pH控制在7.1-7.5。

4.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤S5中的发酵培养基成分重量份包括：玉米粉13-15份、酒糟粉14-16份、花生粕粉6-8份、麸皮14-16份、氯化钠2-4份、磷酸钾43-5份、硫酸锰0.03-0.05份和蒸馏水1000份，且将菌剂发酵培养基的pH控制在7.1-7.5。

5.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述侧孢芽孢杆菌通过以下步骤制备获得：将侧孢芽孢杆菌菌株活化，无菌水冲洗，得到种子液；使用第一培养液对种子液进行扩增培养，得到第一扩增培养液；使用第二培养液对第一扩增培养液进行培养，得到第二扩增培养液；第二扩增培养液进行液体发酵培养，得到发酵液；将发酵液淋入固体培养基中进行固体发酵，并进行后处理，得到侧孢芽孢杆菌发酵菌液。

6.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述土壤短芽孢杆菌通过以下步骤制备获得：将分离得到的短小芽孢杆菌菌株转接到NA固体培养基，37℃恒温培养12h；之后从其中挑取单菌落，接入装量为20mLNA培养基的100mL三角摇瓶中，置于控温摇床，37℃，离心220r/min培养12h后制备获得菌液。

7.根据权利要求1所述的一种微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌菌株通过以下步骤制得：将解淀粉芽孢杆菌菌株接种到肉汤培养基中活化得到活化液；将活化液接种到发酵培养基中进行发酵培养得到解淀粉芽孢杆菌菌液。

8.一种微生物菌剂，通过上述权利要求1-7任意一条所述的制备方法制备获得，其特征在于：包括以下重量份组分成分：侧孢芽孢杆菌25～35份、土壤短芽孢杆菌10～15份、解淀粉芽孢杆菌15～20份。

9.一种微生物菌剂的运用，使用权利要求8所述的微生物菌剂，其特征在于：可以有效提高土壤环境，对瓜果、蔬菜、果树、花卉、棉花、水稻作物的根腐病、烂根、死苗、猝倒、立枯病、枯菱病、沤根症状进行预防和改善。