[发明专利]一种同时测定9种N-亚硝胺类化合物含量的方法

说明书

本发明提供了一种同时测定9种N‑亚硝胺类化合物含量的方法，属于分析检测技术领域。本发明提供的同时测定9种N‑亚硝胺类化合物含量的方法，包括以下步骤：将待测样本与内标物溶液混合进行前处理，得到待测液；所述待测样本包括尿液样本或血浆样本；将所述待测液进行超高效液相色谱‑串联四极杆复合线性离子阱质谱分析，得到待测液的色谱图；根据9种N‑亚硝胺类化合物的基质工作曲线或标准曲线与待测液的色谱图，得到待测样本中9种N‑亚硝胺类化合物的含量。本发明方法能够快速、准确的检测待测样本中9种N‑亚硝胺类化合物的含量。

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，尤其涉及一种同时测定9种N-亚硝胺类化合物含量的方法。

背景技术

N-亚硝胺类(N-nitrosamines，NAs)化合物是一类危害性极高的化合物，它与苯并芘、黄曲霉毒素并称世界三大强致癌物质。N-亚硝胺类化合物主要包括N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基甲基乙基胺(NMEA)、N-亚硝基二乙基胺(NDEA)、N-亚硝基二丙基胺(NDPA)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)、N-亚硝基吗啉(NMOR)、N-亚硝基哌啶(NPIP)、N-亚硝基二丁基胺(NDBA)和N-亚硝基二苯胺(NDPHA)等。大量试验研究表明，N-亚硝胺类化合物具有极强的毒性和致癌性，可以诱发哺乳动物体内几乎全部脏器和组织产生肿瘤，主要能诱发肝脏、肺、食道、鼻粘膜、膀胱、舌头、前胃和胰腺等肿瘤疾病。

目前，检测N-亚硝胺类化合物含量的常用方法包括气相色谱-热能分析仪法以及气相色谱-质谱法，如GB/T 5009.26-2016《食品安全国家标准食品中N-亚硝胺类化合物的测定》中公开的检测方法即为气相色谱-热能分析仪法和气相色谱-质谱法。但是，热能分析仪应用范围窄，仅局限于N-亚硝基二甲胺的分析，限制了其在检测其它N-亚硝胺类化合物中的应用，且仪器价格较贵，一般实验室都没有配备。同时，N-亚硝胺类化合物分子量小，亲水性强，对灵敏度要求高，而气相色谱-质谱法灵敏度较低，操作耗时，准确度和精密度难以把握。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时测定9种N-亚硝胺类化合物含量的方法，本发明建立了9种N-亚硝胺类化合物的超高效液相色谱-串联四极杆复合线性离子阱质谱检测方法，能够快速、准确的检测待测样本中9种N-亚硝胺类化合物的含量。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种同时测定9种N-亚硝胺类化合物含量的方法，所述N-亚硝胺类化合物为N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基二乙基胺、N-亚硝基甲基乙基胺、N-亚硝基二丙基胺、N-亚硝基二丁基胺、N-亚硝基吡咯烷、N-亚硝基吗啉、N-亚硝基哌啶和N-亚硝基二苯胺，包括以下步骤：

将待测样本与内标物溶液混合进行前处理，得到待测液；所述待测样本包括尿液样本或血浆样本；

将所述待测液进行超高效液相色谱-串联四极杆复合线性离子阱质谱分析，得到待测液的色谱图；

当所述待测样本为尿液样本时，根据9种N-亚硝胺类化合物的基质工作曲线与待测液的色谱图，得到待测样本中9种N-亚硝胺类化合物的含量；所述基质工作曲线为含有内标物的空白待测样本中加标9种N-亚硝胺类化合物中待测物质量浓度与待测物色谱峰面积和内标物色谱峰面积的比值的线性回归方程；

当所述待测样本为血浆样本时，根据9种N-亚硝胺类化合物的标准曲线与待测液的色谱图，得到待测样本中9种N-亚硝胺类化合物的含量；所述标准曲线为含有内标物的9种N-亚硝胺类化合物混合标准溶液中待测物质量浓度与待测物色谱峰面积和内标物色谱峰面积的比值的线性回归方程；

所述超高效液相色谱-串联四极杆复合线性离子阱质谱的超高效液相色谱条件包括：