[发明专利]小柴胡复方制剂指纹图谱及其构建方法和小柴胡复方制剂的含量测定方法

说明书

本发明属于中药制剂的质量检测技术领域，具体提供了小柴胡复方制剂指纹图谱及其构建方法和小柴胡复方制剂的含量测定方法，其中，小柴胡复方制剂指纹图谱的构建方法包括以下步骤，(1)小柴胡复方制剂供试品溶液的制备；(2)取小柴胡复方制剂供试品溶液采用高效液相色谱法检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲酸的水溶液‑乙腈为流动相梯度洗脱，并通过反复试验得到洗脱程序，在本发明的洗脱条件下，不仅显著增加了共有峰个数，而且明显提高了共有特征峰的分离度，大大缩短检测时间，而且各共有峰峰形良好且无干扰，从而能够更加全面、清楚、有效的对小柴胡复方制剂进行质量检测。

技术领域

本发明属于中药制剂的质量检测技术领域，具体涉及一种小柴胡复方制剂指纹图谱及其构建方法和小柴胡复方制剂的含量测定方法。

背景技术

小柴胡颗粒是由柴胡、黄芩、党参、大枣水提部分与姜半夏、生姜70％醇提部分混合浓缩、制粒得到的复方制剂。用于治疗外感病，邪犯少阳证，症见往来寒热、胸胁苦满、食欲不振、心烦喜呕、口苦咽干。

国家食品药品监督管理局共有98家企业具有小柴胡颗粒生产批号，现行中国药典(2020年版)仅对小柴胡颗粒中黄芩苷进行含量限定要求。现有技术中已有研究建立小柴胡颗粒指纹图谱检测方法，但这些指纹图谱均是建立在同一厂家的多个批次样品上，不能代表市面上不同厂家生产的小柴胡颗粒样品。

例如，专利文献CN105786771A中公开了一种小柴胡复方制剂的指纹图谱检测方法，然而该方法构建的指纹图谱存在共有特征峰个数少，各特征峰分离度差，耗时长的问题。

因此，研究一种新的有效、准确、全面地检测小柴胡复方制剂质量的方法成为了亟待解决的问题。

发明内容

因此，本发明的目的在于解决现有技术中小柴胡复方制剂指纹图谱的构建方法得到的指纹图谱的共有峰个数少、分离度不佳以及耗时长的问题，提供了一种小柴胡复方制剂指纹图谱及其构建方法。

具体的，本发明公开了一种小柴胡复方制剂纹图谱的构建方法，包括以下步骤，

(1)小柴胡复方制剂供试品溶液的制备；

(2)取小柴胡复方制剂供试品溶液采用高效液相色谱法检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-含甲酸的水溶液为流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱程序包括0-2min→2-4min→4-7.5min→6-10.5min→9-16min→13-18min→15-21min→18-22min→19-24min→21-30min→23-31min，流动相中乙腈的体积百分数为：15-17％→15-20％→20-28％→28％→28-35％→35-50％→50-52％→52％→52-60％→60-80％→65-80％。

根据本发明任一项所述的构建方法，步骤(1)包括：称取小柴胡复方制剂，加溶剂提取，得到提取液，固液分离，取液体，即为供试品溶液。

某些优选的实施方式中，本发明通过使用正交表对不同来源、不同性质的原料药进行合理组合，然后按照药典方法制得多批柴胡颗粒标准汤剂冻干粉，利用这些批次小柴胡颗粒标准汤剂冻干粉构建生成了小柴胡复方制剂对照指纹图谱，建立的指纹图谱方法更加适用于市面上小柴胡颗粒的评价。

某些优选的实施方式中，本发明公开了一种小柴胡复方制剂纹图谱的构建方法，包括以下步骤，