[发明专利]一种高纯度多杀菌素的制备方法

说明书

本发明公开了一种高纯度多杀菌素的制备方法，属于生物医药提纯技术领域，具体包括如下步骤：首先向多杀菌素粗品中加入有机溶剂，加热溶解后，加入一定量的水，降温过滤得到滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；然后向步骤（1）得到的滤液Ⅰ中再加入一定量的水，搅拌结晶后过滤、干燥得到高纯度的多杀菌素和滤液Ⅱ，滤液Ⅱ蒸干后得到滤渣Ⅱ与步骤（1）中过滤得到的滤渣Ⅰ以及多杀菌素粗品原料合并，用于下一次制备高纯度多杀菌素的原料。本发明操作简单，多杀菌素收率高，可以达到92%以上，多杀菌素的含量大于97%，其中A组分与D组分的质量比大于4：1。

技术领域

本发明属于生物医药提纯技术领域，具体涉及一种高纯度多杀菌素的制备方法。

背景技术

多杀菌素，英文名称spinosad，主要组分是spinosyn A和spinosyn D，是20世纪90年代初期由陶氏益农公司开发的一种大环内酯类杀虫抗生素，由放线菌刺糖多孢菌(Saccharopolysporaspinosa)发酵产生。因其具有较高的杀虫选择性和环境兼容性，1999年荣获美国总统绿色化学挑战奖。多杀菌素杀虫谱十分广泛，对包括鳞翅目、缨翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目、等翅目等在内的害虫均具有很高的杀虫活性。其选择毒性远高于其他常用的化学农药、生物农药，而对哺乳类、鱼类、两栖类等的毒性极低，具有毒力高、杀虫谱广、非靶标毒性低、对环境安全等优点，已广泛应用于棉花、茶叶、蔬菜等多种农作物及果树害虫防治。

目前国内外从发酵液中分离提取多杀菌素的方法主要有两种，溶媒萃取法和树脂吸附提取法。溶媒萃取法较其他方法分离速度快，收率高，且产品质量有保证，但是此法需消耗大量有机试剂。如果产生乳化现象，则需要高速离心设备，造成分离纯化过程复杂，并降低了产品收率，并且通过萃取方法很难得到高纯度产品。大孔吸附树脂是一类不含交换基团且具有大孔结构的有机高聚物吸附剂。采用大孔吸附树脂法提取多杀菌素可节约大量有机溶剂，操作简便安全，树脂可以再生，反复利用可以降低生产成本。但以上两种方法均很难在保证高回收率的同时，获得高纯度的多杀菌素。

多杀菌素的国标中规定其主要组分A组分和D组分的质量比必须大于等于4。因此，在制备高纯度多杀菌素的同时，还必须保证其中A组分和D组分含量符合质量标准要求，由于在有机溶剂和水中D组分的溶解度远小于A组分，具体数据如表1所示。

表1多杀菌素A组分和D组分溶解度

因此若直接使用有机溶剂和水的混合溶液进行重结晶，虽然能提高多杀菌素的总含量，但易造成多杀菌素A组分与D组分质量比小于4，不能满足质量标准的要求。而且，若多杀菌素粗品的含量低于93％，很难在保证高回收率的同时，通过一次重结晶即可得到97％以上高纯度多杀菌素，这无疑增加了高纯度多杀菌素制备方法的开发难度。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种高纯度多杀菌素的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种高纯度多杀菌素的制备方法，具体包括如下步骤：

(1)向多杀菌素粗品中加入有机溶剂，加热溶解后，加入一定量的水，降温过滤得到滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ；

(2)向步骤(1)得到的滤液Ⅰ中再加入一定量的水，搅拌结晶后过滤、干燥得到高纯度的多杀菌素和滤液Ⅱ，滤液Ⅱ蒸干后得到滤渣Ⅱ与步骤(1)中过滤得到的滤渣Ⅰ以及多杀菌素粗品原料合并，用于下一次制备高纯度多杀菌素的原料。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤(1)中多杀菌素粗品的含量为85-95％，其中A组分与D组分的质量比为3:1-10:1。

本发明技术方案的进一步改进在于：多杀菌素粗品中A组分与D组分的质量比为3.5:1-6:1。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤(1)中降温至20℃。