[发明专利]一种靶向肿瘤细胞线粒体的肽基纳米药物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种靶向肿瘤细胞线粒体的肽基纳米药物LND-GFFYK-cyclen，其特征在于它是将氯尼达明和轮环藤宁分别共价结合在疏水性短肽的两端，得到的多肽衍生物能够在水溶液中通过分子间非共价键相互作用自组装形成微观形貌为纳米纤维的纳米药物，其化学结构如下：

其中LND为氯尼达明，cyclen为轮环藤宁，GFFYK为甘氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-酪氨酸-赖氨酸残基构成的短肽链。

2.权利要求1所述靶向肿瘤细胞线粒体的肽基纳米药物LND-GFFYK-cyclen的制备方法，其特征在于按如下的步骤进行：

首先通过Fmoc固相合成法合成LND-GFFYK, 称取0.1-0.3 mmol粗品溶解在1-3 mLDMSO中，加入0.15-0.45 mmol的轮环藤宁活化酯，用DIEA调节反应液pH至8~9；室温反应6-12h后，加入95%的三氟乙酸反应0.5-2 h脱去轮环藤宁上的保护基基团；通过反相HPLC分离纯化得到目的产物；其中，所述的轮环藤宁活化酯制备方法如下：

1）将6 g轮环藤宁34.8 mmol和24 mL DIEA溶于40 mL DCM中，室温滴加24 mL二碳酸二叔丁酯104.5 mmol，滴加完毕室温搅拌5-8小时，将反应液浓缩得粗品；粗品硅胶柱层析得无色油状物中间产物1；

2）将14.1 g中间产物1 29.8 mmol、2.9 mL溴乙酸甲酯29.8 mmol、8.3 g碳酸钾59.7mmol溶于50 mL DMF中，升至70-80℃搅拌过夜；减压蒸去溶剂得粗品，粗品硅胶柱层析得无色油状化合物中间产物2；

3）将14.2 g中间产物2 26.1 mmol溶于30 mL THF中，加入30 mL 2N氢氧化钠溶液，升至60-80℃搅拌过夜；减压蒸去THF后，用1N盐酸将反应液调pH至5~6，乙酸乙酯萃取3-5次后合并有机相，将有机相用饱和氯化钠、无水硫酸钠干燥后减压浓缩得粗品；将粗品溶于50mL DMF中，加入7.7 gHBTU 20.2 mmol和2.3 gNHS 20.2 mmol，室温搅拌过夜；减压蒸去DMF后，将粗品溶于乙酸乙酯中，用饱和氯化钠、无水硫酸钠干燥后减压浓缩得目的产物。

3.权利要求1所述靶向肿瘤细胞线粒体的肽基纳米药物LND-GFFYK-cyclen在制备提高肿瘤治疗疗效药物中的应用；其中提高肿瘤治疗疗效指的是：提高游离LND对肿瘤的特异性杀伤及放疗增敏效应。