[发明专利]一株防治核桃落果病的芽孢杆菌及应用

说明书

本发明公开了一株防治核桃落果病的芽孢杆菌及应用，芽孢杆菌为Bacillus siamensis菌株CT04，于2018年6月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.15943，以期望解决现有的通过化学药剂防治核桃该病害，不仅会增强病原微生物的抗药性，降低防治效果，而且会对环境造成严重污染，并危及人、畜健康与安全和生态环境的问题。

技术领域

本发明涉及微生物应用领域，更具体的说，本发明主要涉及一株防治核桃落果病的芽孢杆菌及应用。

背景技术

核桃（Juglans regis L）是世界四大干果之一，果实营养丰富，含有人体所需的多种微量元素，和不饱和脂肪酸。四川省是我国核桃生产大省，资源极其丰富，产量居全国第二。近年来四川核产业发展迅猛，全省核桃栽培面积和产量由20世纪50年代的7万亩及年产606t发展到2000年的97.5万亩及年产29834.39t,到2016年底核桃种植面积已达1.95亿亩。但核桃病害发生也呈现爆发趋势。

核桃落果病是由已知的炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、链格孢菌（Alternaria alternata）复合侵染引起的核桃果实黑果、烂果、提前掉果，对核桃产业造成巨大的经济损失，该病害是目前四川地区阻碍核桃产业发展的最重要问题。

目前核桃该病害的防治采用的是化学药剂防治，但长期使用化学农药，不仅会增强病原微生物的抗药性，降低防治效果，而且会对环境造成严重污染，并危及人、畜健康与安全和生态环境。而生物防治是目前病虫害防治的热点，生物防治对环境无污染，对人、畜无危害，能有效的防治病虫害。

发明内容

本发明的目的之一在于解决上述不足，提供一株防治核桃落果病的芽孢杆菌及应用，以期望解决现有的通过化学药剂防治核桃该病害，不仅会增强病原微生物的抗药性，降低防治效果，而且会对环境造成严重污染，并危及人、畜健康与安全和生态环境的问题。

为解决上述的技术问题，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一株防治核桃落果病的芽孢杆菌，其特征在于：所述芽孢杆菌为Bacillus siamensis菌株CT04，于2018年6月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.15943。

本发明还提供一种防治核桃落果病的芽孢杆菌菌剂的制备方法，包括如下步骤，步骤a，将芽孢杆菌菌株在LB固体培养基进行培养，LB固体培养基进行培养中各组分质量分别为，NaCL6～8g，酵母浸膏4～6g，胰蛋白胨8～12g，琼脂粉16～24g，双蒸水定容至1L，pH值为7.0，并划线培养，培养温度30℃，培养时间为24h；步骤b，挑取单菌落接种于LB液体培养基中进行培养，LB液体培养基中各组分质量分别为，NaCL6～8g，酵母浸膏4～6g，胰蛋白胨8～12g，双蒸水定容至1L，pH值为7.0，温度30℃，转速160r/min振荡培养，培养20h；步骤c，将由步骤b制得的培养产物于8000 r/min，离心5min后，静置5～10min，并弃上清，所得沉淀为芽孢杆菌菌体；步骤d，将由步骤c所制得的芽孢杆菌菌体用双蒸水稀释到10⁸～10⁹cfu/mL，即制得防治核桃落果病的芽孢杆菌菌剂。

更进一步的技术方案是：在步骤a中，所述LB固体培养基中各组分质量分别为NaCL7g，酵母浸膏5g，胰蛋白胨10g，琼脂粉20g。

更进一步的技术方案是：在步骤b中，LB液体培养基中各组分质量分别为NaCL7g，酵母浸膏5g，胰蛋白胨10g。

更进一步的技术方案是：所述芽孢杆菌菌剂的活性成分包括芽孢杆菌的发酵培养物、芽孢杆菌、芽孢、发酵上清液。

本发明还提供一种生物农药，所述生物农药包括防治核桃落果病的芽孢杆菌菌剂。