[发明专利]一种高山杜鹃组培繁殖方法

权利要求书

1.一种高山杜鹃组培繁殖方法，包括如下步骤：

S1、外植体诱导：将高山杜鹃的无菌外植体接种于诱导培养基中，诱导产生不定芽丛；

S2、增殖及壮苗培养：将上述产生的不定芽丛切分后接入壮苗培养基中，培养成不定芽；

其特征在于，还包括如下步骤，

S3、生根培养：将上述壮苗培养后的不定芽，接种于定量的营养丰富的生根培养基中，培养28-30天，所述不定芽的基部形成不定根凸起；再将不定芽取出并接入没有任何养分的疏松多孔生根基质中，在无菌条件下培养，10-15天开始诱导产生不定根，50-60天长成具有完整根系的生根苗；

S4、生根苗移栽：将上述生根苗进行移栽，获得成活高山杜鹃组培苗；

所述无菌外植体为高山杜鹃的花苞或/和花蕾中的顶芽；

所述S3中，生根培养基由WPM培养基+IBA+琼脂+蔗糖组成，

所述IBA的质量浓度为0.5～1mg·L^-1；琼脂的质量浓度为7g·L^-1；蔗糖的质量浓度为30g·L^-1；

所述生根培养基的pH值为5.8；

所述S3中，所述疏松多孔生根基质为疏松多孔珍珠岩和/或疏松多孔蛭石。

2.根据权利要求1所述的一种高山杜鹃组培繁殖方法，其特征在于，所述无菌外植体采用如下方法获得：

选取具有4-5厘米长花枝、膨大未绽放且内部保持完好无菌环境的花蕾，采用乙醇溶液喷洒在花蕾表面进行灭菌后，在无菌环境下利用无菌刀片逐层环剥花蕾的苞片，获得无菌花苞或/和无菌顶芽，该无菌花苞或/和无菌顶芽为无菌外植体。

3.根据权利要求1所述的一种高山杜鹃组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤S1中，将无菌外植体接种于诱导培养基中后10-14天，对未污染外植体进行切分，然后再次接入诱导培养基中，80-90天后，获得愈伤组织并形成不定芽丛。

4.根据权利要求1所述的一种高山杜鹃组培繁殖方法，其特征在于，所述步骤S4中，在生根苗移栽时，将具有完整根系的生根苗移栽入由草炭和珍珠岩混合得到的、pH值为5.9-7.0的生长基质中，培养30-40天后获得成活高山杜鹃组培苗。

5.根据权利要求1所述的一种高山杜鹃组培繁殖方法，其特征在于，所述S1中，诱导培养基由WPM培养基+TDZ+NAA+琼脂+蔗糖组成；

所述TDZ的质量浓度为0.5～2mg·L^-1；NAA的质量浓度为0～0.5mg·L^-1；琼脂的质量浓度为7g·L^-1；蔗糖的质量浓度为30g·L^-1；

所述诱导培养基的pH值为5.8。

6.根据权利要求1所述的一种高山杜鹃组培繁殖方法，其特征在于，所述S2中，增殖及壮苗培养基由WPM培养基+TDZ+IBA+GA₃+琼脂+蔗糖组成；

所述TDZ的质量浓度为0～0.1mg·L^-1；IBA的质量浓度为0～0.1mg·L^-1；GA₃的质量浓度为5～7mg·L^-1；琼脂的质量浓度为7g·L^-1；蔗糖的质量浓度为30g·L^-1；

所述增殖及壮苗培养基的pH值为5.8。

7.根据权利要求1所述的一种高山杜鹃组培繁殖方法，其特征在于，所述S4中，生根苗移栽时，将生根苗移出无菌环境，并在空气相对湿度不低于80％且阴凉通风处进行培养。