[发明专利]骨形成蛋白在促进人皮肤成纤维细胞分化成脂肪细胞中的应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及骨形成蛋白在促进人皮肤成纤维细胞分化成脂肪细胞中的应用。所述应用具体为在诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞之前，采用骨形成蛋白预处理所述人皮肤成纤维细胞；所述骨形成蛋白的浓度为50～400ng/mL，处理时间为12～48h。本发明在诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞之前采用骨形成蛋白进行预处理，有效提高了人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的效率，为临床上的创伤修复、疤痕修复以及脂营养不良症的治疗提供新思路、新方法。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及骨形成蛋白在促进人皮肤成纤维细胞分化成脂肪细胞中的应用。

背景技术

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)又称骨形成蛋白，是一组具有类似结构的高度保守的功能蛋白，属于TGF-β家族。骨形成蛋白可以刺激间充质细胞定向分化为成骨细胞，是体内诱导骨和软骨形成的主要因子，对骨骼的发育和再生修复起重要作用。骨形成蛋白广泛地存在于存在于猪、牛、羊、兔、鼠及人的胚胎、血细胞、肾和脾脏等组织中，其不仅参与骨骼的调节，而且对肾脏、肝脏、骨骼及神经系统发育也起到一定作用。

现有技术存在有通过各种试剂组合促使人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的方法，但是这些方法中的人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的效率相对较低，很难在临床上广泛用于创伤修复、疤痕修复以及脂营养不良症治疗等。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供骨形成蛋白在促进人皮肤成纤维细胞分化成脂肪细胞中的应用。

第一方面，本发明提供骨形成蛋白在促进人皮肤成纤维细胞分化成脂肪细胞中的应用。

本发明发现在诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞之前，采用骨形成蛋白进行预处理可以有效提高人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞的效率。

第二方面，本发明提供一种促进人皮肤成纤维细胞分化成脂肪细胞的方法，包括：

在诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞之前，采用骨形成蛋白预处理所述人皮肤成纤维细胞；

所述骨形成蛋白的浓度为50～400ng/mL，处理时间为12～48h。

进一步地，所述骨形成蛋白的浓度为100～200ng/mL，处理时间为12～24h。

进一步地，所述骨形成蛋白为骨形成蛋白2或骨形成蛋白4。

进一步地，在所述人皮肤成纤维细胞汇合度达到50-70％时进行所述预处理流程。

进一步地，所述诱导人皮肤成纤维细胞分化为脂肪细胞为：

将预处理后的人皮肤成纤维细胞置于分化培养基一中培养6～10天；后置于分化培养基二中培养2～4天；后置于基础培养基中培养8～12天；

所述分化培养基一为额外添加了地塞米松、胰岛素、罗格列酮或1-甲基-3-异丁基黄嘌呤中至少两种的基础培养基；

所述分化培养基二为额外添加胰岛素的基础培养基。

进一步地，所述基础培养基为包括：10％～20％胎牛血清、50～150U/mL青霉素和50～150U/mL链霉素的高糖DMEM培养基。

进一步地，所述分化培养基一为额外添加了0.5～1μM地塞米松、10～20μg/mL胰岛素、1～2μM罗格列酮和0.5～1mM 1-甲基-3-异丁基黄嘌呤的基础培养基；

所述分化培养基二为额外添加了10～20μg/mL胰岛素的基础培养基。

进一步地，所述人皮肤成纤维细胞的代数≤10。

本发明进一步提供所述方法制备得到的脂肪细胞。

本发明具备如下有益效果：