[发明专利]利用多态性SSR引物鉴定韭菜品种的方法及引物及应用

权利要求书

1.鉴定韭菜品种的多态性SSR引物，其特征在于，包括SSR19、SSR38、SSR43、SSR61、SSR168或SSR374，上述引物对应的上下游核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-12所示。

2.利用权利要求1所述的多态性SSR引物鉴定韭菜品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：韭菜DNA提取、PCR扩增、PCR产物电泳和染色。

3.根据权利要求2所述的鉴定韭菜品种的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系如下：20ng/μL的DNA模板3μL、2×Taq Master Mix for PAGE 4μL、浓度为10μmol/L的上下游引物各1.5μL、ddH₂O补足10μL；

PCR扩增的程序为：94℃预变性5min，94℃变性30s，55-56℃退火30s，72℃延伸60s，30个循环，最后72℃延伸10min。

4.根据权利要求3所述的鉴定韭菜品种的方法，其特征在于，所述SSR19、SSR38、SSR43、SSR61、SSR168、SSR374对应的退火温度均为55℃。

5.根据权利要求3所述的鉴定韭菜品种的方法，其特征在于，所述SSR19和所述SSR38各有两个特异性位点，所述SSR43、SSR61、SSR168、SSR374各有一个特异性位点；观察染色后的电泳图，在相同迁移位置上有带记为“1”，无带记为“0”，组成如下“0，1”矩阵：

6.根据权利要求5所述的利用多态性SSR引物鉴定韭菜品种的方法，其特征在于，所述韭菜品种包括但不限于内蒙古野生韭-2、四季青、长沙香韭、V08A0221、平韭2号、中华韭王阳光种苗、马蔺韭、汉中冬韭。

7.根据权利要求6所述的利用多态性SSR引物鉴定韭菜品种的方法，其特征在于，所述韭菜品种内蒙古野生韭-2、四季青、长沙香韭、V08A0221、平韭2号、中华韭王阳光种苗、马蔺韭、汉中冬韭的“0，1”矩阵分别为01001010、11000101、11111010、01000100、11110101、11110111、11000001、10110100。

8.根据权利要求1所述的多态性SSR引物在鉴定韭菜品种中的应用。

9.根据权利要求5所述的“0，1”矩阵在鉴定韭菜品种中的应图。