[发明专利]一种靶向人程序性死亡配体1（PD-L1）的单可变域抗体及其衍生物

说明书

本公开提供一种靶向人程序性死亡配体1(PD‑L1)的单可变域抗体及其衍生物。由人PD‑L1免疫骆驼提取PBMC构建噬菌体表面展示VHH抗体库，筛选鉴定获得抗人PD‑L1特异性单可变域抗体2‑2F2，在此基础上制备嵌合抗体chF2和人源化改造的抗体hzF2突变体。所述hzF2突变体的亲和力能够达到甚至超过初始单可变域抗体2‑2F2，在体外能够阻断PD‑1和PD‑L1的结合，在荷瘤小鼠体内试验中能够抑制肿瘤的生长。

本专利申请要求于2020年4月22日提交的申请号为CN 202010324761.8的中国发明专利申请的优先权权益，在此将其全部内容引入作为参考。

技术领域

本发明涉及抗体药物领域，具体而言，本发明涉及靶向人程序性死亡配体1(PD-L1)的单可变域抗体、其衍生蛋白及其用于制备药物的用途，特别是在治疗和/或预防、或诊断PD-L1相关疾病例如肿瘤中的用途。

背景技术

PD-1及其配体PD-L1是肿瘤免疫的重要靶点。PD-1、PD-L1是一对免疫抑制分子，是免疫系统防止自身免疫过激的重要组成部分，其通路的激活具有抑制肿瘤免疫应答、诱导肿瘤特异性T细胞凋亡的作用,与肿瘤发展关系密切。PD-1(CD279)是一种I型跨膜蛋白,属于免疫球蛋白超家族成员,主要表达于活化的CD4+T细胞、CD8+T细胞及B细胞等免疫细胞上。其配体PD-L1(又名B7-H1,CD274)属于B7家族成员,在肿瘤浸润免疫细胞(TIC)，以及多种恶性肿瘤细胞中高表达，如恶性黑色素瘤、非小细胞肺癌、头颈鳞癌等。利用单克隆抗体阻断PD-1、PD-L1通路治疗肿瘤，目前在临床上显示出良好的疗效和安全性，已有多种抗体类药物获批上市，适应症包括黑色素瘤、非小细胞肺癌、晚期肾细胞癌等多种恶性肿瘤，同时很多正在进行的临床试验尝试开发更多新的适应症。

虽然PD-1/PD-L1单抗在各种恶性肿瘤临床治疗中显示出良好治疗效果，但是存在用药量大、总体反应率低等问题。其原因主要包括PD-L1表达量低、肿瘤微环境中T细胞耗竭等。因此仍有必要对PD-1/PD-L1靶点进一步深度开发，研制具有更好临床效果的治疗药物。在该靶点的药物研发方面，通过以下途径可能会增加临床患者的获益。(1)进一步开发亲和力更高，活性更好的抗体分子；(2)基于该靶点的双特异抗体或类似物；(3)初步研究表明PD-L1阳性肿瘤患者对PD-L1抑制剂的应答率远高于PD-L1阴性肿瘤患者，因此需要有效的生物标志物来预测PD-L1阳性肿瘤患者或提前筛选患者，以降低治疗费用和可能的严重不良反应；(4)为了提高应答率，联合用药成为肿瘤免疫治疗的发展趋势，如与其他肿瘤免疫药物的联用，与靶向药物、化疗或放疗的联用。