[发明专利]用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液在审
申请号: | 202110433681.0 | 申请日: | 2021-04-22 |
公开(公告)号: | CN113136412A | 公开(公告)日: | 2021-07-20 |
发明(设计)人: | 鲍柳君;孙秀娟;张洪成;郑淑雅 | 申请(专利权)人: | 浙江珂瑞康生物医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24;C12Q1/22;C12Q1/06 |
代理公司: | 北京博维知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11486 | 代理人: | 张倩 |
地址: | 311199 浙江省杭州市余杭区余*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 可溶性 蛋白 生物 医用 材料 负载 测定 处理 | ||
1.用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液,其特征在于,所述处理液为胶原酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合溶液;所述处理液的制备方法,包括以下步骤:
分别配制3×终浓度的胶原酶溶液、终浓度的胰蛋白酶溶液和终浓度的木瓜蛋白酶溶液,混合均匀后调节pH值,用滤膜过滤除菌和除杂质,制得所述处理液。
2.根据权利要求1所述的用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液,其特征在于,所述终浓度胶原酶为0.02%~0.20%、终浓度胰蛋白酶0.05%~0.25%、终浓度木瓜蛋白酶0.05%~0.50%。
3.根据权利要求2所述的用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液,其特征在于,所述终浓度胶原酶、终浓度胰蛋白酶和终浓度木瓜蛋白酶质量比为1:1:1。
4.根据权利要求1所述的用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液,其特征在于,所述处理液的pH值为7.0~7.5。
5.根据权利要求1所述的用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液,其特征在于,所述调节pH值选用1M NaOH或1M HCl。
6.根据权利要求1所述的用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液,其特征在于,所述滤膜直径为0.22μm。
7.根据权利要求1-6任一项所述的用于含可溶性蛋白生物医用材料的生物负载测定处理液的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:以无菌操作,取出含可溶性蛋白生物医用材料样品,剪碎或浸提,用0.1%蛋白胨水冲洗液洗脱2次,充分振荡,将样品和冲洗液倒入无菌瓶,加入处理液,样品与处理液的比例为10:1~20:1,37℃~44℃消化3~10分钟,再将洗脱液用滤膜抽滤;
然后再用0.1%蛋白胨水充分洗脱分解样品3次,每次充分振荡3分钟,将洗脱液用滤膜抽滤,将抽滤后的全部滤膜贴在胰酪大豆胨琼脂培养基上;
最后,把胰酪大豆胨琼脂培养基倒入无菌瓶中进行培养,在30~35℃温度下,培养3~5天后,计数。
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