[发明专利]一种极寒草原区AM真菌诱集培养的方法

说明书

本发明公开了一种极寒草原区AM真菌诱集培养的方法，其方法包括：将寄主植物种植在由采集的植物根系及根际土样和沙子、蛭石组成的混合培养基质中，诱集培养后收获诱集基质。本发明的培养方法既能保证所采集土壤中菌种资源的活力，还能保证菌种的丰富度，有效的解决了AM真菌采集后菌种活力显著下降的问题，为AM真菌菌种形态、分子鉴定和地方菌种资源建立单一菌种培养提供必要条件。

技术领域

本发明涉及土壤真菌扩繁培育领域，具体涉及一种极寒草原区AM真菌诱集培养的方法。

背景技术

菌根是自然界中一种普遍的植物共生现象，它是土壤中的菌根真菌菌丝与高等植物营养根系形成的一种联合体。丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhiza fungi，AMF)就是这样一类内生菌根真菌，可侵染陆地生态系统90％的高等植物根系，形成互利共生体。由于部分AM真菌不在根内产生泡囊，但均形成丛枝，因此这类共生体被称为丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza，AM)。由于AMF的菌丝比宿主植物根系更细且密度更大，AMF能够吸收到宿主植物根系无法触及的土壤养分元素，能明显改善宿主植物的营养状况。由于丛枝菌根真菌是专性活体营养型真菌，必须与植物根系共生才能繁殖。

极寒草原区主要分布在内蒙古中东部草原区，有着极为丰富的草原菌种资源，而直接从野外采集的样品，存在的土壤孢子通常活力较低；由于根系结构、化学组成、土壤理化特性、温度、湿度及土壤微生物活动的影响而失去或改变了其原有的结构特征；另外采集的植物根系和土样量少，容易将偶见种和少见种丢失导致资源遗漏和鉴定工作的失误。即使有效的从土壤中采集到较丰富的AM真菌，在后期培养中不能保证菌种的丰富度、菌种孢子的活力及菌种的产孢能力。而如何克服菌种采集后菌种孢子活力及菌种产孢能力下降的问题成为本领域技术人员亟待解决技术难题。

发明内容

本发明的目的是提供一种极寒草原区AM真菌诱集培养的方法，以解决上述现有技术存在的问题，通过提高AM真菌的菌种孢子的活力及菌种的产孢能力，实现极寒草原区AM真菌菌种资源建立、菌种鉴定和株系的建立，达到提高极寒地区农林业开发生产的目的。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种极寒草原区AM真菌诱集培养的方法，包括以下步骤：将寄主植物种植在极寒草区采集的植物根系及根际土样和沙子、蛭石组成的混合培养基质中，诱集培养后收获诱集基质。

进一步地，所述的采集的植物根系及根际土样为贝加尔针茅(Stipa baicalensisRoshev.)、线叶菊(Filifolium sibiricum(Linn.)Kitam.)、羊草(Leymus chinensis(Trin.)Tzvel)三种植物的根系及根际土样；所述的寄主植物为玉米、高粱、三叶草、苜蓿中的一种或多种组合物，种植深度2cm。

进一步地，所述的寄主植物为数量比为1:1:1:1的玉米、高粱、三叶草、苜蓿种子混合物。

进一步地，所述的植物根系及根际土样的采集时间为宿主植物停止生长，丛枝菌根发育完全，大部分孢子成熟时期；采集方法为清除表土，用消毒铁锹将目标植物根系及根际土团一同挖出，装袋，切碎。

进一步地，所述的沙子、蛭石均经过灭菌处理，沙子、植物根系及根际土样、蛭石的体积比例为1:1:1。

进一步地，所述的诱集培养包括寄主植物培养，培养条件包括：光照强度500～1000mmol m^-2s^-1，温度为30℃，空气湿度为60～70％，土壤水分含量为8％～15％，培养时间为90～120d。