[发明专利]一种古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒三种活性成分含量同时测定的方法

说明书

本发明公开了一种古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒三种活性成分含量同时测定的方法，该方法采用的色谱条件如下：色谱柱为AgilentZORBAX SB‑C18(250mm×4.6mm,5μm)，以乙腈‑0.1％甲酸梯度洗脱，流速为1.0ml·min^‑1，检测波长：绿原酸、阿魏酸为320nm和龙胆苦苷为277nm，柱温30℃，进样量为10μl。在此色谱条件下，绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸的线性范围分别为9.848～59.088μg·ml^‑1(R＝0.99895)、49.588～297.528μg·ml^‑1(R＝0.99904)和6.016～36.096μg·ml^‑1(R＝0.9976)，平均加样回收率分别为101.4％(RSD＝2.4％)、97.2％(RSD＝2.7％)100.0％(RSD＝2.7％)(n＝6)。绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸色谱峰分离良好，浓度峰面积呈良好的线性关系。本方法简单、快速、准确、重现性好，可为全面评价和控制古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒的质量提供理论依据。

技术领域

本发明涉及一种中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒中三种活性成分的检测方法，具体的说是一种古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒三种活性成分含量同时测定的方法，属于医药技术领域。

背景技术

中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒祛风除湿，蠲痹止痛，主治风寒湿三气合而成痹者。中医痹症，现代中医将其称之为尪痹，指风寒湿邪侵袭关节，气血痹阻所致的骨关节病，以小关节疼痛，肿胀，晨僵，甚至变形为特点，西医病名类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)为其中一种。类风湿性关节炎为自身免疫疾病，治愈难，发病率有逐年上升的趋势。蠲痹颗粒处方出自清代程国彭《医学心悟》。蠲痹汤，因临床用于防治RA，疗效确切，获批为国家古代经典名方类新药，医学前景良好。

目前国内关于中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒制剂质量控制方面少有研究，为使制剂质量得到有效控制，因此选择绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸为蠲痹颗粒的质量评价指标，为控制中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒质量提供科学依据。

本发明建立了同时测定中药新药古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒中绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸三种成分含量的检测方法，实验结果表明，本法建立的HPLC同时测定制剂中多个不同指标成分的含量测定方法，简单快速、准确可靠，重复性及稳定性均较好，可作为该制剂的质量控制方法。

发明内容

本发明目的在于提供一种同时测定古代经典名方复方制剂蠲痹颗粒中三种活性成分的方法的方法，该方法简单、稳定、重现性好，可用于该药品的质量控制。

本发明的目的是这样实现的：利用高效液相色谱检测的方法，同时测定制剂中处方药材主要成分绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸的含量，具体步骤如下：

(1)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸、龙胆苦苷、阿魏酸对照品适量，加甲醇溶解，分别制成浓度为0.9849mg/ml、0.99176mg/ml及1.00287mg/ml的对照品储备液。另取上述溶液适量，置于同一量瓶中，加甲醇稀释，制成含绿原酸、龙胆苦苷及阿魏酸浓度分别为0.2955mg/ml、1.4876mg/ml、0.2006mg/ml 的混合对照品溶液，置于冰箱贮存，备用。

(2)供试品溶液的制备：取蠲痹颗粒约2g，精密称定，加入0.1％甲酸甲醇溶液定容至25ml，超声提取40min，补足减失的重量，滤过，取续滤液过0.22μm微孔滤膜，备用。

(3)色谱条件及样品检测：将混合对照品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪，采用如下色谱条件检测，色谱柱为AgilentZORBAX SB-C18(250mm×4.6mm,5μm)，以乙腈-0.1％甲酸梯度洗脱，流速为1.0ml·min^-1，检测波长：绿原酸、阿魏酸为320nm和龙胆苦苷为277nm，柱温30℃，进样量为10μl。记录峰面积计算含量即可。

本发明具有以下优点和积极效果：