[发明专利]一种核酸的提取方法以及用于核酸提取的试剂盒在审
| 申请号： | 202110444181.7 | 申请日： | 2021-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN112980832A | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 刘莹;张博;宋昆;李毅;邵攀霖;程立;傅暘;杨烽;王光会 | 申请（专利权）人： | 南方科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 覃蛟 |
| 地址： | 518000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 提取 方法 以及 用于 试剂盒 | ||
1.一种核酸的提取方法，其特征在于，其包括采用裂解液对样本进行裂解；所述裂解液包括以下组分：工作浓度为0.5～6M的强离子性离液盐、工作浓度为0.5v/v％～10v/v％的表面活性剂、工作浓度10v/v％～50v/v％的醇溶液。
2.根据权利要求1所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述强离子性离液盐选自异硫氰酸胍、盐酸胍、碘化钠和高氯酸钠中至少一种；
优选地，所述表面活性剂为tween20、triton-X100、Brij25和NP40中的至少一种；
优选地，所述醇溶液为无水乙醇和异丙醇中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的核酸的提取方法，其特征在于，裂解温度为15～30℃。
4.根据权利要求1～3任一项所述的核酸的提取方法，其特征在于，进行裂解的过程中或裂解后，所述提取方法还包括在样本与裂解液的混合液中添加结合液和磁珠，以使所述磁珠对样本中的核酸进行吸附；
优选地，所述结合液包括无水乙醇。
5.根据权利要求4所述的核酸的提取方法，其特征在于，吸附核酸后，所述提取方法还包括：富集磁珠，采用洗涤液对磁珠进行洗涤；
优选地，所述洗涤液包括异丙醇、无水乙醇和水中的至少一种。
6.根据权利要求5所述的核酸的提取方法，其特征在于，洗涤后，所述提取方法还包括采用洗脱液对所述磁珠上吸附的核酸进行洗脱，获取核酸样本；
优选地，所述洗脱液包括以下组分：无DNase和RNase酶的无菌水、Tris缓冲液和TE缓冲液中的至少一种；
优选地，所述Tris缓冲液为摩尔浓度为1～10mM的Tris-HCl；
优选地，所述Tris缓冲液的pH值为7.5～8.5；
优选地，所述TE缓冲液包括Tris-HCl和EDTA，且Tris-HCl的终浓度为8～12mM，EDTA的终浓度为0.5～3mM，所述的TE缓冲液的pH值为7.5-8.5。
7.根据权利要求1～3任一项所述的核酸的提取方法，其特征在于，所述核酸为病毒RNA或病毒DNA。
8.一种用于核酸提取的试剂盒，应用于如权利要求1～6任一项所述的核酸的提取方法，其特征在于，其包括组成裂解液的以下试剂：强离子性离液盐、表面活性剂和醇溶液。
9.根据权利要求8所述的用于核酸提取的试剂盒，其特征在于，所述裂解液由以下方法配制而成：每10～20g强离子性离液盐，添加1～5g表面活性剂和10～20mL的醇溶液；
优选地，所述强离子性离液盐选自异硫氰酸胍、盐酸胍、碘化钠和高氯酸钠中至少一种。
10.根据权利要求8或9所述的用于核酸提取的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括洗脱液、洗涤液和磁珠中的至少一种。
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