[发明专利]一种基于单分散四臂聚乙二醇的罗丹明B衍生物荧光探针分子及其制备方法

权利要求书

1.一种基于单分散四臂聚乙二醇的罗丹明B衍生物荧光探针分子，其特征在于，具有以下结构，

2.一种基于单分散四臂聚乙二醇的罗丹明B衍生物荧光探针分子中间体式VIII化合物，其特征在于，具有以下结构，

3.一种基于单分散四臂聚乙二醇的罗丹明B衍生物荧光探针分子中间体式VIII化合物的制备方法，其特征在于，具有以下步骤：

步骤一：在无水四氢呋喃中，在氢化钠的作用下式(I)化合物HO-PEG12-OH与式(II)化合物N3-PEG4-Tos发生反应得到式(III)化合物HO-PEG16-N3；

步骤二：在无水四氢呋喃中，在氢化钠作用下，式(IV)化合物四甘醇单磺酸酯HO-PEG4-Tos与式(III)化合物HO-PEG16-N3反应得到式(V)化合物HO-PEG20-N3；

步骤三：在无水四氢呋喃中，在氢化钠作用下，式(V)化合物HO-PEG20-N3与式(II)化合物N3-PEG4-Tos反应获得式(VI)化合物HO-PEG24-N3；

步骤四：在一定温度下，过量的式(VI)化合物HO-PEG24-N3与式(VII)化合物季戊四醇对甲苯磺酸酯反应，从而获得式(VIII)化合物4-Arm-PEG96-N3。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具有以下步骤：

步骤一：在氩气保护下，将式(I)化合物和无水四氢呋喃混合，冰浴条件下冷却至0-5℃，再将氢化钠分三批慢慢加入到反应体系，将反应混合物升至常温，接着添加式(II)化合物的无水四氢呋喃溶液，反应在氩气气氛下进一步搅拌反应48h得到式(III)化合物；

步骤二：在氩气保护下，将式(III)化合物和无水四氢呋喃混合，冰浴条件下冷却至0-5℃，再将氢化钠分三批慢慢加入到反应体系，将反应混合物加热到40℃，接着将式(IV)化合物的无水四氢呋喃溶液缓慢加入到反应体系，反应在氩气气氛下进一步搅拌反应24h得到式(V)化合物；

步骤三：在氩气保护下，将式(V)化合物和无水四氢呋喃混合，冰浴条件下冷却至0-5℃，再将氢化钠分三批慢慢加入到反应体系，将反应混合物加热到40℃，接着将式(IV)化合物的无水四氢呋喃溶液缓慢加入到反应体系，反应在氩气气氛下进一步搅拌反应24h得到式(VI)化合物；

步骤四：在一定温度下，过量的式(VI)化合物HO-PEG24-N3与式(VII)化合物季戊四醇对甲苯磺酸酯反应，从而获得式(VIII)化合物4-Arm-PEG96-N3。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具有以下步骤：

步骤一：在氩气保护下，将式(I)化合物和无水四氢呋喃混合，冰浴条件下冷却至0-5℃，再将氢化钠分三批慢慢加入到反应体系，将反应混合物升至常温，接着添加式(II)化合物的无水四氢呋喃溶液，反应在氩气气氛下进一步搅拌反应48h得到式(III)化合物；

步骤二：在氩气保护下，将式(III)化合物和无水四氢呋喃混合，冰浴条件下冷却至0-5℃，再将氢化钠分三批慢慢加入到反应体系，将反应混合物加热到40℃，接着将式(IV)化合物的无水四氢呋喃溶液缓慢加入到反应体系，反应在氩气气氛下进一步搅拌反应24h得到式(V)化合物；

步骤三：在氩气保护下，将式(V)化合物和无水四氢呋喃混合，冰浴条件下冷却至0-5℃，再将氢化钠分三批慢慢加入到反应体系，将反应混合物加热到40℃，接着将式(IV)化合物的无水四氢呋喃溶液缓慢加入到反应体系，反应在氩气气氛下进一步搅拌反应24h得到式(VI)化合物；

步骤四：在氩气保护下，将式(VI)化合物和甲苯混合，冰浴条件下冷却至0-5℃，再将氢化钠分多次慢慢加入到反应体系，将反应混合物加热到80℃，搅拌2h后，加入式(VII)化合物，将混合物在90℃下搅拌24小时得到式(VIII)化合物。

6.根据权利要求3-5所述的制备方法，其特征在于，步骤三中获得的式(VI)化合物需要通过甲基叔丁基醚多次低温重结晶来进一步纯化。