[发明专利]一种血竭中三种龙血素含量的检测方法

权利要求书

1.一种血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是包括以下步骤：

(1)选取血竭样品，加入乙酸乙酯中，采用涡旋提取后，静置，选取上层的乙酸乙酯相，浓缩，将浓缩物采用甲醇溶解，过滤后，得待测样品；

(2)采用高效液相色谱仪对待测样品中的三种龙血素进行定量分析，以高纯水作为流动相A，100％乙腈作为洗脱相B进行浓度梯度洗脱，其中流动相A：0min，95％；15min，25％；15.1min，0％；洗脱相B：0min，5％；15min，75％；15.1min，100％，流速为1mL/min，色谱柱温度为25℃，进样量为2μL，检测波长为254nm。

2.根据权利要求1所述的血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：步骤(1)中所述血竭样品为龙血树产血竭或已产血竭的龙血树茎干样品。

3.根据权利要求1所述的血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：步骤(1)中所述血竭样品先经研磨处理得血竭粉末样品。

4.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱检测血竭中三种龙血素含量的方法，其特征是：步骤(1)中所述血竭样品与所述乙酸乙酯的用量关系为0.1g：15～25mL。

5.根据权利要求1所述的血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：步骤(1)中涡旋提取时以振荡器涡旋震荡提取3～5次，每次间隔2～5分钟，静置60分钟。

6.根据权利要求1所述的血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：步骤(1)中浓缩时利用旋转蒸发仪于37℃旋转浓缩3～5min至样品干燥。

7.根据权利要求1所述的血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：步骤(1)中将浓缩物采用1mL甲醇充分溶解，并经过2～3次滤孔为0.22μm无菌滤膜过滤后密封保存，放置于-20℃以下冰箱待检测。

8.根据权利要求1所述的血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：步骤(2)中高效液相色谱仪采用Agilent1260 II，色谱柱采用Extend C18 150×4.6mm。

9.根据权利要求1所述的利血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：步骤(2)中所述三种龙血素为龙血素A、龙血素C和龙血素D。

10.根据权利要求9所述的血竭中三种龙血素含量的检测方法，其特征是：所述三种龙血素的出峰时间分别为龙血素D：12.116min，龙血素C：13.329min，龙血素A：16.230min。