[发明专利]含miR-124的胶质瘤细胞外泌体及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 202110446548.9 | 申请日： | 2021-04-25 |
| 公开（公告）号： | CN113082216B | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 池光范;葛鹏飞;于逸飞 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | A61K47/46 | 分类号： | A61K47/46;A61K31/7105;A61P25/00;C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 薛红凡 |
| 地址： | 130012 吉林*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | mir 124 胶质 细胞 外泌体 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种含miR-124的胶质瘤细胞外泌体在制备治疗中枢神经系统损伤疾病的药物中的应用，所述含miR-124的胶质瘤细胞外泌体的制备方法，包括以下步骤：
1)将胶质瘤细胞系培养得到的上清液经固液分离，得到外泌体；
2)将所述外泌体和miR-124混合，共同孵育，得到含miR-124的胶质瘤细胞外泌体；所述miR-124为胆固醇修饰的miR-124-3P mimic；所述外泌体的质量和miR-124的体积比为1000μg：(45～55)μl；
所述miR-124的浓度为18～22μM。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，步骤2)中所述共同孵育的温度为35～38℃；
所述共同孵育的时间为1～1.5h。
3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述共同孵育后，将孵育产物进行纯化；所述纯化的方法为将孵育产物经固液分离，收集固相，用PBS缓冲液洗涤和重悬，经离心得到含miR-124的胶质瘤细胞外泌体。
4.根据权利要求1～3任意一项所述应用，其特征在于，步骤1)中所述固液分离包括离心和过滤；
所述固液分离的方法为将所述上清液依次经2800～3200g和9000～11000g离心力进行离心，收集沉淀后滤膜过滤，再经11500～12500g离心。
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