[发明专利]一种用于肿瘤诊疗一体化的纳米复合药物及其制备方法

权利要求书

1.一种用于肿瘤诊疗一体化的纳米复合药物的制备方法，具体包括以下步骤：

（1）合成双面神结构探针Au-I：

采用现有技术合成50 nm的金纳米粒子，通过将氨基涂覆的载玻片浸入AuNPs溶液中过夜，将AuNPs吸附到载玻片上；然后将载玻片浸入一端修饰巯基，一端修饰环炔的巯基聚乙二醇二苯并环辛炔SH-PEG-DBCO中2小时，再超声处理2分钟，超声后分散在pH7.4，0.01％吐温的磷酸盐缓冲液中；

将带叠氮基修饰具有靶向功能DNA与其互补链按1：1.2混合并在95℃下退火5分钟，形成具有靶向和载药功能的DNA双链；

通过点击反应与超声处理使具有靶向和载药功能的DNA双链与一面修饰SH-PEG-DBCO的AuNPs相连；

再利用Au-S键将TCEP处理后的巯基ATP适体DNA连接在AuNP上，在12小时内向所得溶液中缓慢添加NaCl进行老化，8000r离心5分钟去除过量的DNA，得到一面具有靶向和载药功能DNA，一面ATP适体DNA的双面神结构探针，将其分散在pH 7.4的三乙酸盐缓冲液中保存待用，

（2）加载药物

加载化疗药物DOX制备Au-I-DOX，将化疗药物DOX与制备的双面神结构探针Au-I混合三小时以上，反应结束后通过在8000r离心5分钟从溶液中去除过量的药物并分散在三羟甲基氨基甲烷缓冲液中，得到Au-I-DOX，

加载化疗药物DOX和光动力药物TMPyP4制备Au-I-D/T，将TMPyP4与Au-I-DOX探针混合通过在7500 rpm下离心5分钟除去游离的TMPyP4，得到Au-I-D/T，

将探针分子5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）DTNB与制备的双面神结构探针Au-I一起孵育过夜，

所述带叠氮基修饰具有靶向功能DNA 序列为N3-GGC GGA GCC CTA ACC CTA ACC CTAACC CTG GTG GTG GTG GTT GTG GTG GTG GTG G-3’；带叠氮基修饰具有靶向功能DNA互补链序列为 TAGGGCTCCGCC-3’；ATP适体DNA由SH-TTTTTTTTTACCTGGGGGAGTAT和SH-TTTTTTTTTTGCGGAGGAAGGT组成。