[发明专利]一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法有效
申请号: | 202110454520.X | 申请日: | 2021-04-26 |
公开(公告)号: | CN113142054B | 公开(公告)日: | 2022-07-08 |
发明(设计)人: | 郭生虎;陈虞超;李明;朱永兴;关雅静;张茜;石磊;刘华 | 申请(专利权)人: | 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心(宁夏农业生物技术重点实验室) |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 苏士莹 |
地址: | 750002 宁夏回族*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄芪 工厂 化组培快繁 方法 | ||
1.一种膜荚黄芪的工厂化组培快繁方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)以膜荚黄芪的幼嫩组织为外植体,将所述外植体接种到愈伤组织诱导培养基上进行愈伤诱导培养,得愈伤组织;所述愈伤组织诱导培养基由MS培养基、1.0~3.0mg/L 2,4-D、0.3~0.5mg/L 6-BA、30.0g/L蔗糖和4.58g/L琼脂粉组成,pH值为5.5~5.8;所述幼嫩组织包括幼嫩的叶片和茎段;所述愈伤诱导培养的温度为21~23℃,先暗培养10~14d,再光照培养7~10d;所述光照培养时每天的光照时间为14h,光照强度为2000~3000Lux;
(2)将所述愈伤组织接种到增殖分化培养基上进行增殖分化培养,得丛生芽;所述增殖分化培养基由MS培养基、1.0~2.0mg/L 6-BA、0.2~0.4 mg/L NAA、0.1~0.2mg/L IAA、30.0g/L蔗糖和4.58g/L琼脂粉组成,pH值为5.5~5.8;所述增殖分化培养的温度为23~25℃,光照时间为14h/d,光照强度为2000~3000Lux;所述增殖分化培养每21d继代培养1次,继代培养2~3次;所述增殖分化培养后还包括将丛生芽接种到丛生芽增殖培养基上进行丛生芽增殖培养,所述丛生芽增殖培养基由MS培养基、0.5~1.0mg/L 6-BA、0.2~0.4mg/L NAA、30.0g/L蔗糖和4.58g/L琼脂粉组成,pH值为5.5~5.8
(3)将所述丛生芽分割成单芽,接种到开放式生根培养基上进行生根培养,得膜荚黄芪组培快繁苗;所述开放式生根培养基由1/2MS培养基、0.3~0.5mg/L IBA、0.5~1.0mg/L IAA、1.0~2.0ml/L抑菌剂、30.0g/L蔗糖和4.58g/L琼脂粉组成;所述生根培养的温度为23~25℃,光照时间为16h/d,光照强度为3000Lux,培养15~18d;所述抑菌剂包括以下重量百分含量的有效成分:0.5%卡松、1%~2%山梨酸钾和0.1%~0.2%次氯酸钠。
2.根据权利要求1所述组培快繁方法,其特征在于,步骤(1)所述外植体在接种前,还包括预处理,所述预处理包括用流动的清水冲洗所述外植体30min,用质量百分含量为2%的次氯酸钠水溶液处理10min,无菌水冲洗3~4次,再用0.1%的升汞溶液浸泡6min,无菌水冲洗3~4次。
3.根据权利要求1所述组培快繁方法,其特征在于,所述丛生芽增殖培养的温度为23~25℃,光照时间为16h/d,光照强度为4000~5000Lux,每21d继代培养1次。
4.根据权利要求1所述组培快繁方法,其特征在于,在步骤(3)得到所述膜荚黄芪组培快繁苗后,还包括炼苗和移栽。
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