[发明专利]一种鉴定SMV-SC3的LAMP引物组、试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种鉴定SMV-SC3的LAMP引物组，其特征在于，包括1对内引物、1对外引物和1对环引物，序列如下：

内引物SC3-FIP-2：

5’-TGCTCATCATCAAGCTCATATTCAT-ACACTCGAGCAACAAGAAC-3’；

内引物SC3-BIP-2：

5’-TGGTCATGAATGGTTTCATGGT-CCATCCATCATCACCCAC-3’；

外引物SC3-F3-2：5’-CTTGAGTATAAACCTAATCAGGT-3’；

外引物SC3-B3-2：5’-CGGATATTCAATTTGTTCCTCT-3’；

环引物SC3-LF-2：5’-TTGTACCACGCTTCAAACTGT-3’；

环引物SC3-LB-2：5’-ATTGACAATGGCACATCTCCAGA-3’。

2.一种鉴定SMV-SC3的LAMP试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述LAMP引物组。

3.根据权利要求2所述的一种鉴定SMV-SC3的LAMP试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括甜菜碱、dNTP Mix、Bst DNA聚合酶、10×buffer、MgSO₄、cDNA模板，SYBR Green I核酸染料和去离子双蒸水。

4.根据权利要求2所述的一种鉴定SMV-SC3的LAMP试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中各引物的浓度为：SC3-FIP/SC3-BIP浓度为20μM，SC3-F3/SC3-B3、SC3-LF/SC3-LB浓度为10μM；所述试剂盒中甜菜碱的浓度为5mM，dNTP浓度为10mM，Bst DNA聚合酶浓度为8u/μL，MgSO₄的浓度为25mM，SYBR Green I核酸染料的浓度为1000X。

5.一种如权利要求2所述一种鉴定SMV-SC3的LAMP试剂盒的使用方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：

S1、制备待测样品的cDNA，作为LAMP反应的cDNA模板；

S2、配制LAMP反应体系，在LAMP反应之前，预先在盖顶部加入SYBR Green I核酸染料，进行环介导等温扩增反应；

S3、结果判断，若反应体系由橙色变为荧光绿，则待测样品为阳性，若反应体系保持橙色，则待测样品为阴性。

6.根据权利要求5所述一种鉴定SMV-SC3的LAMP试剂盒的使用方法，其特征在于，所述LAMP反应的温度为64-68℃。

7.根据权利要求5所述一种鉴定SMV-SC3的LAMP试剂盒的使用方法，其特征在于，所述LAMP反应的甜菜碱的终浓度为0.4-1.2mol/L。