[发明专利]一种用于马铃薯腐烂茎线虫的可视化检测的检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种鉴定马铃薯腐烂茎线虫的引物，其由引物F和引物R组成；

所述引物F为序列1所示的单链DNA分子；

所述引物R为序列2所示的单链DNA分子；所述引物R的5'末端标记生物素。

2.一种鉴定马铃薯腐烂茎线虫的试剂，包括权利要求1所述的引物和探针；

所述探针由序列3所示的单链DNA分子、四氢呋喃和序列4所示的单链DNA分子组成；所述探针的5'末端标记荧光基团，且所述探针的3'末端修饰Spacer C3。

3.含有权利要求1所述引物或权利要求2所述试剂的PCR试剂或试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括凝胶电泳相关试剂或侧流层析试纸条。

5.权利要求1所述引物或权利要求2所述试剂或权利要求3所述的PCR试剂或试剂盒在如下任一中的应用：

1)鉴定或辅助鉴定马铃薯腐烂茎线虫；

2)鉴定或辅助鉴定待测线虫是否为马铃薯腐烂茎线虫；

3)鉴定或辅助鉴定待测样本中是否含有马铃薯腐烂茎线虫。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：待测样本为植物或者土壤。

7.一种鉴定待测样本中是否含有马铃薯腐烂茎线虫的方法，包括如下步骤：用权利要求1所述的引物对待测样本进行重组酶聚合酶扩增，电泳检测扩增产物；若所述扩增产物大小为155-165bp，则所述待测样本含有或候选含有马铃薯腐烂茎线虫；若所述扩增产物大小不为155-165bp，则所述待测线样本不含有或候选不含有马铃薯腐烂茎线虫。

8.一种鉴定待测线虫是否为马铃薯腐烂茎线虫的方法，包括如下步骤：用权利要求1所述的引物对待测线虫进行重组酶聚合酶扩增，电泳检测扩增产物；若所述扩增产物大小为155-165bp，则所述待测线虫为或候选为马铃薯腐烂茎线虫；若所述扩增产物大小不为155-165bp，则所述待测线虫不为或候选不为马铃薯腐烂茎线虫。

9.一种鉴定马铃薯腐烂茎线虫的方法，包括如下步骤：用权利要求2中的所述的引物和所述探针对待测样本进行重组酶聚合酶扩增，侧流层析试纸条检测扩增产物；若所述试纸条的质控线和检测线全部出现条带，则待测样本含有或候选含有马铃薯腐烂茎线虫；若所述试纸条的检测线出现条带且质控线不出现条带，则待测线样本不含有或候选不含有马铃薯腐烂茎线虫。

10.一种鉴定待测线虫是否为马铃薯腐烂茎线虫的方法，包括如下步骤：用权利要求2中的所述的引物和所述探针对待测线虫进行重组酶聚合酶扩增，侧流层析试纸条检测扩增产物；若所述试纸条的质控线和检测线全部出现条带，则所述待测线虫为或候选为马铃薯腐烂茎线虫；若所述试纸条的检测线出现条带且质控线不出现条带，则所述待测线虫不为或候选不为马铃薯腐烂茎线虫。