[发明专利]创制水稻大长粒型新种质的方法

权利要求书

1.水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因、其编码蛋白或水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因的抑制因子在调控植物籽粒大小或千粒重中的应用。

2.水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因、其编码蛋白或水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因的抑制因子在植物育种中的应用。

3.水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因、其编码蛋白或水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因的抑制因子在植物种质资源改良中的应用。

4.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，OsD-h基因的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，或者为与其具有至少70％的序列同一性的保留其功能的活性变体序列；

LOC_Os01g10460基因的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，或者为与其具有至少70％的序列同一性的保留其功能的活性变体序列；

所述抑制因子为能够破坏所述基因的生物学功能的核酸分子或蛋白分子。

5.创制水稻大长粒型新种质的方法，其特征在于，包括：使水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因的生物学功能丧失；

优选地，OsD-h基因的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，或者为与其具有至少70％的序列同一性的保留其功能的活性变体序列；

LOC_Os01g10460基因的编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，或者为与其具有至少70％的序列同一性的保留其功能的活性变体序列。

6.根据权利要求5所述的创制水稻大长粒型新种质的方法，其特征在于，所述使水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因的生物学功能丧失通过基因编辑实现；所述基因编辑通过选自以下的序列特异性核酸酶中的一种或多种进行：CRISPR/Cas9、CRISPR/Cpf1、CRISPR/Cas12a、TALEN、大范围核酸酶和ZFN；

优选地，所述基因编辑利用CRISPR/Cas9基因编辑载体进行；

更优选地，所述CRISPR/Cas9基因编辑载体包含第一sgRNA和第二sgRNA，所述第一sgRNA和第二sgRNA分别靶向SEQ ID NO:5-6所示的核苷酸序列。

7.由权利要求5或6所述的创制水稻大长粒型新种质的方法创制得到的水稻在水稻育种或种质资源改良中的应用。

8.由权利要求5或6所述的创制水稻大长粒型新种质的方法创制得到的水稻种子制备得到的产品，所述产品为选自食品、饲料或工业原材料中的一种或多种。

9.靶向水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因的sgRNA，其特征在于，其包括第一sgRNA和第二sgRNA，所述第一sgRNA包含SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列，所述第二sgRNA包含SEQ IDNO:8所示的核苷酸序列。

10.靶向水稻OsD-h和LOC_Os01g10460基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体，其特征在于，所述载体包含第一表达盒和第二表达盒，所述第一表达盒表达Cas9，所述第二表达盒表达sgRNA，

所述sgRNA包含SEQ ID NO:7和/或SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列，或与其具有至少70％的序列同一性的保留其功能的活性变体序列；

优选地，所述Cas9包含SEQ ID NO:9所示的核苷酸序列或与其具有至少70％序列同一性并编码相同功能的蛋白质的活性变体序列。