[发明专利]一种颌骨或骨干发育不良小鼠模型的构建方法有效
| 申请号： | 202110459500.1 | 申请日： | 2021-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN113249406B | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | 胡颖;李鸿宇;王小予;董蕊 | 申请（专利权）人： | 首都医科大学附属北京口腔医院 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A01K67/027;C12N15/11;C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 钱云 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 颌骨 骨干 发育 不良 小鼠 模型 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种颌骨或骨干发育不良小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括：
将小鼠基因组中Ano5基因第360位氨基酸由半胱氨酸突变为酪氨酸。
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，包括：基于CRISPR/Cas9方法，通过打靶载体将小鼠基因组中Ano5基因第360位氨基酸由半胱氨酸突变为酪氨酸。
3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述打靶载体包括如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，包括：
构建所述打靶载体，并转染ES细胞；
将sgRNA和Cas9核酸酶的mRNA经体外转录后，和打靶载体阳性的ES细胞一起置于小鼠囊胚中。
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述sgRNA为如SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3所示的核苷酸序列。
6.根据权利要求1-5任一项所述的构建方法，其特征在于，所述小鼠为野生型小鼠。
7.打靶载体或包括所述打靶载体的试剂盒在构建颌骨或骨干发育不良小鼠模型中的应用；
所述打靶载体包括如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
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