[发明专利]谷胱甘肽刺激诱导聚集型复合金纳米颗粒及其制备

权利要求书

1.一种谷胱甘肽刺激诱导聚集型复合金纳米颗粒，其特征在于，该复合纳米颗粒Au@PDA-ss-PEGm内部为金纳米颗粒，金纳米颗粒外部包覆有聚多巴胺涂层，在聚多巴胺涂层外部接枝有甲氧基封端胱胺化氨基聚乙二醇；

复合纳米颗粒Au@PDA-ss-PEGm在进入肿瘤细胞后，在谷胱甘肽的还原下会使得聚乙二醇包覆层中双硫键被还原为巯基进而脱去该包覆层，颗粒聚集形成聚集体，金纳米颗粒原先处于可见光区域的表面等离子共振峰会红移至近红外光区域，在近红外区出现光吸收带；

金纳米颗粒的粒径为20-40 nm，聚多巴胺包覆层的厚度在6-10 nm。

2.如权利要求1所述的谷胱甘肽刺激诱导聚集型复合金纳米颗粒的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

（1）活化甲氧基封端羧基聚乙二醇的羧基端：按摩尔比配制EDC、NHS和甲氧基封端羧基聚乙二醇mPEG-COOH溶液，溶剂为DMF，将上述溶液混合后放入恒温磁力搅拌机中按条件进行搅拌反应；

（2）偶联胱胺二盐酸：向步骤（1）所得混合溶液中按摩尔比加入胱胺二盐酸Cys，并加入40 μL三乙胺，放入恒温磁力搅拌机中按条件进行搅拌反应；

（3）提纯得到白色絮状目标产物甲氧基封端胱胺化氨基聚乙二醇mPEG-CONH-ss-NH₂，进行冷冻干燥处理备用；

（4）采用种子介导生成法制备尺寸为20-40 nm的金纳米颗粒：在三口瓶中加入50 mL柠檬酸钠水溶液，加热至100℃后加入0.34 mL氯金酸水溶液，生成粒径大小为6-10 nm的金颗粒种子后，将温度降至90 ℃；

（5）向步骤（4）所得溶液中立即加入0.34 mL柠檬酸钠水溶液与0.34 mL氯金酸水溶液，该过程重复三次后得到尺寸为20-40 nm的金纳米颗粒水溶液，离心提纯，于4 ℃保存；

（6）配制多巴胺水溶液，向多巴胺水溶液中加入步骤（5）中所制备的金纳米颗粒水溶液，调节 pH为8.5，超声，离心提纯，得到Au@PDA纳米颗粒胶体水溶液；

（7）取0.1 g mPEG-CONH-ss-NH₂配制5 mL的水溶液，向其中加入5 mL步骤（6）制备的Au@PDA纳米颗粒胶体水溶液，调节pH为8.5，放入恒温磁力搅拌机上进行反应，反应结束后离心提纯，得到谷胱甘肽刺激诱导聚集型金纳米颗粒Au@PDA-ss-PEGm NPs。

3.如权利要求2所述的谷胱甘肽刺激诱导聚集型复合金纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，EDC、NHS、mPEG-COOH 和Cys 的摩尔比为 4 : 6 : 1 : 5。

4.如权利要求2所述的谷胱甘肽刺激诱导聚集型复合金纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤（1）和（2）中进行搅拌反应时需在避光环境下进行，并需鼓氮除氧，步骤（1）中搅拌反应时间为6-8小时，步骤（2）中搅拌反应时间为10-14小时。

5.如权利要求2所述的谷胱甘肽刺激诱导聚集型复合金纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤（4）中柠檬酸钠水溶液浓度为2.2 mM，氯金酸水溶液浓度为25 mM。

6.如权利要求2所述的谷胱甘肽刺激诱导聚集型复合金纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤（5）中柠檬酸钠水溶液浓度为60 mM，氯金酸水溶液浓度为25 mM。