[发明专利]一种载药纳米笼的制备方法与其靶向循环肿瘤细胞释放雷公藤甲素的应用

说明书

本发明公开了本发明一种介孔结构载药纳米笼的制备方法，具体包括下列步骤：制备氨基介孔硅纳米笼，将功能化的DNA序列、氨基介孔硅纳米笼和药物雷公藤在分散液中持续搅拌，经沉淀、离心清洗两次后，实现在氨基介孔硅纳米笼的介孔封装嵌插抗癌药物雷公藤甲素，即可得到载药纳米笼，同时提供了其靶向循环肿瘤细胞释放雷公藤甲素的应用。本发明属于医学技术领域，具体指一种载药纳米笼的制备方法与其靶向循环肿瘤细胞释放雷公藤甲素的应用。

技术领域

本发明属于医学技术领域，具体为一种载药纳米笼的制备方法与其靶向循环肿瘤细胞释放雷公藤甲素的应用。

背景技术

还原型谷胱甘肽(GSH)是一种由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸缩合而成的含有γ－酰胺键和巯基的三肽，也是细胞里被发现的主要非蛋白巯基化合物，它是细胞里含量最丰富的抗氧化因子。还原型谷胱甘肽(GSH)在细胞代谢、细胞增殖、细胞内环境稳定以及抗病性上起着重要作用。谷胱甘肽存在于二硫化合物(GSSG氧化型的)与巯基化合物(GSH还原型的)之前的氧化还原平衡中，活细胞内的还原型谷胱甘肽的水平显著的改变了相应的氧化应激，这种氧化应激已经在很多疾病和加速老化过程中有涉及。在氧化应激时，还原型谷胱甘肽可以被转化成氧化型(GSSG)去保护细胞免受氧化应激和协助捕获那种伤害RNA或DNA的自由基。作为一种敏感的指示剂，细胞内GSH和GSSG的最佳比例的任何变化能够导致人类的疾病比如：癌症、心脏病、中风和许多神经系统疾病。尤其是在一些癌细胞内，细胞质内还原型谷胱甘肽的浓度与正常细胞相比普遍更高。因此，对体内谷胱甘肽的检测在疾病诊断中起着非常重要的作用。

目前，荧光检测、电化学、高效液相色谱法、化学发光法和分光光度法被广泛的用来研究GSH。然而，这些方法存在衍生化作用、复杂的实验程序、耗时、体内应用受限，从而不利于实际操作的发展，并且难以实现有效地靶向给药。石英晶体微天平(QCM)因其对质量变化的高敏感性，传感器具有特异性好、灵敏度高、成本低廉和操作简单的优势，越来越受到了科学界的关注，在疾病分析检测领域中具有很好的应用潜力。此外，近些年的研究中，作为纳米载体的介孔硅纳米笼引起广泛关注，该纳米笼表面可以进行化学修饰、较高的比表面积、特征纳米结构、生物相容性及高负载功能。作为一种纳米级别的分子，DNA以其自身的可编程性、结构的多样性和变化的可控性等诸多优点而活跃于纳米科学、生物科学和材料科学。

因此，有必要利用碱基的精确配对和序列可设计的特性，设计一种DNA功能化的纳米笼，以实现对循环肿瘤细胞的高特异性和高灵敏性的检测，以及向循环肿瘤细胞内靶向还原型谷胱甘肽释放抗癌药物。

发明内容

针对上述情况，为弥补上述现有缺陷，本发明基于一种DNA功能化的纳米笼，并以此纳米笼为抗癌药物载体，制备了一种介孔结构载药纳米笼；并基于修饰循环肿瘤细胞适体的芯片，通过石英晶体微天平技术实现了对循环肿瘤细胞的高特异性和高灵敏性的检测，同时细胞内靶向还原型谷胱甘肽释放抗癌药物，减少对正常细胞不必要的损伤，本发明提供的介孔结构载药纳米笼制备方法简单，对循环肿瘤细胞的检测高灵敏高，具有靶向释放药物的性能，适用于各种人体内的循环肿瘤细胞的快速检测和靶向释放药物。

本发明提供如下的技术方案：

一种载药纳米笼的制备方法，具体包括下列步骤：制备氨基介孔硅纳米笼，将功能化的DNA序列、氨基介孔硅纳米笼和药物雷公藤在分散液中持续搅拌，经沉淀、离心清洗两次后，实现在氨基介孔硅纳米笼的介孔封装嵌插抗癌药物雷公藤甲素，即可得到载药纳米笼。

进一步地，所述功能化的DNA序列为三种DNA序列发生链式杂交反应的含双硫键的链式杂交产物。