[发明专利]一种靶向SARS-CoV-2 N蛋白的干扰肽的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种靶向SARS‑CoV‑2N蛋白的干扰肽的制备方法，该方法包括如下步骤：设计干扰肽段靶向位于SARS‑CoV‑2N蛋白的二聚化结构域内的氨基酸；将所述干扰肽段与HIV‑TAT融合；将与HIV‑TAT融合的干扰肽段修饰为逆向异构体，获得最终干扰肽NIP‑V的氨基酸序列；使用D‑型氨基酸为原料合成干扰肽NIP‑V。上述干扰肽药物NIP‑V能够与SARS‑CoV‑2N蛋白的二聚结构域相互作用，抑制N蛋白寡聚化，进而解除N蛋白对先天免疫的抑制，从而达到抑制SARS‑CoV‑2病毒在细胞和动物体内复制的目的。

技术领域

本发明属于药物制备技术领域，具体涉及一种靶向SARS-CoV-2 N蛋白的干扰肽的制备方法及应用。

背景技术

SARS-CoV-2属冠状病毒属(Coronavirus，CoV)，其基本结构由刺突(spike，S)蛋白、包膜(envelope，E)蛋白、膜(membrane，M)蛋白、核衣壳(nucleocapsid，N)蛋白以及基因组单链RNA组成。N蛋白是病毒粒子的核心成分，SARS-CoV-2 N蛋白全长419个氨基酸，主要由N端RNA结合结构域、C端二聚结构域以及连接两个结构域的其他序列构成。SARS-CoV-2 N蛋白全序列含有多个较为保守的结合RNA的正电荷分布区域，其与病毒基因组RNA结合，将RNA包装成核糖核蛋白(ribonucleocapsid，RNP)复合体，此外其二聚结构域能够介导SARS-CoV-2 N蛋白形成同源寡聚体。目前在新型冠状病毒肺炎防治相关工作中，预防以全球逐渐开始接种的多类SARS-CoV-2疫苗为主流，但治疗则缺乏特效药。小分子药物一般研制周期很长，目前都是旧药新用，且药效饱受质疑，比如羟氯喹、洛匹那韦/利托那韦以及瑞德西韦等。除小分子药物外，血浆疗法虽好，但有一定风险。因为血浆因人而异，是一个复杂的混合物，而且血浆来源有限，不能大规模使用。

因此，针对上述问题，有必要提出进一步的解决方案。

发明内容

本发明目的是提供一种靶向SARS-CoV-2 N蛋白的干扰肽的制备方法，以制备一种干扰肽药物(以下命名为NIP-V)用于抑制细胞和动物体内SARS-CoV-2的复制和增殖，治疗SARS-CoV-2感染相关的疾病。

本发明的技术方案是：一种靶向SARS-CoV-2 N蛋白的干扰肽的制备方法，该方法包括如下步骤：

(a)设计干扰肽段靶向位于SARS-CoV-2 N蛋白二聚结构域内的氨基酸；

(b)将所述干扰肽段与HIV-TAT融合；

(c)将与HIV-TAT融合的干扰肽段修饰为逆向异构体，获得最终干扰肽NIP-V的氨基酸序列；

(d)使用D-型氨基酸为原料合成干扰肽NIP-V。

进一步的，在步骤(a)中，所述氨基酸为346-357位氨基酸。

进一步的，所述346-357位氨基酸的氨基酸序列为FKDQVILLNKHI。

进一步的，所述氨基酸为L-型天然氨基酸。

进一步的，在步骤(b)中，所述HIV-TAT的氨基酸序列为YGRKKRRQRRR。

进一步的，在步骤(c)中，所述最终干扰肽NIP-V的氨基酸序列为IHKNLLIVQDKFPPRRRQRRKKRG，分子量为3040.69。

本发明的另一技术方案是：一种靶向SARS-CoV-2N蛋白的干扰肽在抗SARS-CoV-2感染药物中的应用。

本发明提供了一种靶向SARS-CoV-2 N蛋白的干扰肽NIP-V的制备方法及应用，其优点是：