[发明专利]KLHL37基因在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用

说明书

本发明公开了KLHL37基因在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用，具体是在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用。本发明在采用RNA干扰技术降低KLHL37表达后，神经母细胞瘤细胞的克隆形成能力和异种移植瘤生长受到显著的抑制。因此，本发明不仅公开了KLHL37基因的应用，而且为神经母细胞瘤提供了新的治疗靶点。

技术领域

本发明属医药生物技术领域，具体涉及一种KLHL37基因在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用。

背景技术

神经母细胞瘤是一类起源于神经嵴交感神经的外周神经系统恶性肿瘤，是婴幼儿中最常见和最致命的颅外实体肿瘤，约90％患者的确诊年龄不超过5岁。原发性神经母细胞瘤常位于交感神经系统、肾上腺髓质或椎旁神经节起源的组织。神经母细胞瘤按照风险评级可依此分为低危型、中危型和高危型，低危型和中危型患者的预后通常较好(无事件生存率约为80％-95％)，但高危型患者由于常伴随MYCN基因扩增，ALK基因扩增或突变和Trk异常表达等分子特征，病情进展迅速，临床治愈率低于35％，其预后和生存状况不容乐观。因此，寻找神经母细胞瘤治疗的新型潜在靶标和干预手段是目前临床治疗较为迫切的需求。

KLHL37蛋白属于Cullin3-RING泛素化E3酶的底物适配器，在调控蛋白质泛素化过程中发挥对底物蛋白的特异性选择作用。目前关于KLHL37蛋白的研究报道较少，主要包括：1)KLHL37蛋白可通过抑制结肠细胞分化进而促进结直肠癌的发展；2)在髓母细胞瘤中存在异常上调；3)与卵巢癌和乳腺癌患者的不良预后密切相关。这些研究提示KLHL37蛋白可能参与肿瘤的发生发展过程，但是KLHL37蛋白在神经母细胞瘤中的作用尚未见文献明确报道。因此，KLHL37蛋白在神经母细胞瘤中的作用有待进一步研究。

发明内容

本发明的目的是提供KLHL37基因在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用，是一种靶向KLHL37基因的干扰siRNAs在制备神经母细胞瘤治疗药物中的应用。所述的KLHL37基因核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述的靶向KLHL37基因的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述的干扰siRNAs的核苷酸序列分别为：

SEQ ID NO:3：5’CGAGTCTGCAATTAACTGGAT 3’ (﹟1)

SEQ ID NO:4：5’CTCTCTAAAGCAGGTAGAACA 3’(﹟2)

以上所述药物的制剂形式为液体制剂或固体制剂。

本发明通过应用针对KLHL37基因的siRNAs达到下调KLHL37的作用，从而研究KLHL37在神经母细胞瘤中的作用。2个针对KLHL37基因的siRNAs(SEQ ID NO:3-SEQ ID NO:4)均能抑制KLHL37的表达，进而抑制神经母细胞瘤。具体表现为对神经母细胞瘤SK-N-DZ和SK-N-BE(2)细胞的克隆形成能力有显著抑制作用，以及对SK-N-BE(2)异种移植瘤的生长有显著抑制作用。

本发明采用RNA干扰技术降低KLHL37后，神经母细胞瘤细胞的克隆形成能力受到显著的抑制，神经母细胞瘤异种移植瘤的生长受到显著的抑制。因此，本发明不仅公开了KLHL37基因的应用，而且为神经母细胞瘤提供了新的治疗靶点。

本发明利用siRNA干扰技术，通过降低KLHL37的表达可以显著抑制神经母细胞瘤细胞(SK-N-DZ和SK-N-BE(2))的克隆形成能力，显著抑制SK-N-BE(2)异种移植瘤的生长。因此首次提出KLHL37基因是神经母细胞瘤恶性进展的关键基因，KLHL37的siRNAs分子可以作为有效干预手段，用于神经母细胞瘤的治疗。

本发明提供KLHL37 siRNA在制备神经母细胞瘤治疗药物中的用途。下调KLHL37可以有效抑制神经母细胞瘤的克隆形成能力和异种移植瘤的生长，为目前神经母细胞瘤治疗药物的开发提供了新的方向。总之，下调KLHL37可以抑制神经母细胞瘤的克隆形成能力和异种移植瘤生长，为制备新的神经母细胞瘤药物，提高患者疗效，改善预后和生存提供了可能性。