[发明专利]一种测定蔬菜中硒形态含量的方法

权利要求书

1.一种测定蔬菜中硒形态含量的方法，其特征在于，所述方法使用离子对反相高效液相色谱-紫外-氢化物发生-原子荧光光谱法测试待测样品中的硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸、硒脲、硒代蛋氨酸、硒代乙硫氨酸、亚硒酸根和硒酸根7种硒形态和含量；

包括如下步骤：

S1：取1份待测样品加入碘乙酰胺溶液，使用超声波提取后过滤上机测试，测定亚硒酸根的形态和含量；

S2：取另外1份待测样品，加入水后超声破壁，再加入蛋白酶使用超声波提取后过滤上机测试，测定除亚硒酸根以外硒的形态和含量；

步骤S1和S2中所述上机测试的仪器分析测试条件为：

液相色谱条件： C18 反相色谱柱，250×4.6 mm，5µm，流动相为30 mmol/L磷酸氢二铵溶液，其中含有0.5 mmol/L四丁基溴化铵，同时含有2%甲醇，pH为6.0，流速为1.2 mL/min，进样量为100 µL，柱温为35℃；

紫外条件：紫外灯功率40 w，长度28 cm，在线紫外消解；

氢化物发生条件：0.35％氢氧化钾+0.05％碘化钾，0.35％氢氧化钾+1.5％硼氢化钾，10％盐酸，泵转速60 r/min；

原子荧光光谱条件：负高压300 V，灯总电流80 mA，载气流量300 mL/min，屏蔽气流量500 mL/min，原子化器高度9 mm；

步骤S2中所述蛋白酶为蛋白酶K，其与所述待测样品质量比为1：30-1：40；

所述超声破壁的功率为60-90 w，时间为60-90s；

步骤S1中碘乙酰胺的浓度为1-5mmol/L；

步骤S1和S2中所述超声提取的频率为20 kHz频率超声，温度为50-60℃，时间为30min，重复2次。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1和步骤S2中，所述过滤包括将经超声波提取后的溶液使用滤纸过滤定容，滤液再经超滤离心管离心净化，最后过膜取溶液液体。

3.根据权利要求2所述的方法，所述定容体积为10-25 mL；

所述膜为尼龙滤膜，孔径为0.45 µm。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，步骤S1和S2中，所述待测样品为表面用纯水冲洗干净/擦干、经过匀浆机匀浆1-2min后的蔬菜，所述待测样品每一份的质量为0.5-5 g。