[发明专利]双特异性四价抗体及其制造和使用方法

权利要求书

1.一种双特异性四价抗体，所述双特异性四价抗体包含：

两条IgGl重链；

两条κ轻链；以及

两个单链Fv(scFv)结构域；

其中所述两条IgGl重链和κ轻链形成对EGFR家族的第一成员具有结合特异性的IgG部分；

其中所述两个scFv结构域对EGFR家族的第二成员具有结合特异性，且每个scFv结构域通过具有(gly-gly-gly-gly-ser)_n的氨基酸序列的连接体连接到所述IgGl重链中任一个的C-端，以提供IgGl-连接体连接，其中n是至少1的整数；以及

其中每个单链Fv结构域具有N端-重链可变区-接头-轻链可变区-C端或N-端-轻链可变区-接头-重链可变区-C-端的结构顺序，其中所述接头由(gly-gly-gly-gly-ser)_m的氨基酸序列组成，其中m是至少3的整数。

2.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中n是1至10的整数。

3.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中m是3、4、5、或6。

4.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链中至少一个是人源化或人IgGl重链。

5.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述两个IgGl重链是人源化或人IgGl重链。

6.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述κ轻链中至少一个是人源化或人κ轻链。

7.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中两条κ轻链均是人源化或人κ轻链。

8.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgG部分具有对HER3的结合特异性并且所述单链Fv结构域同时具有对EGFR的结合特异性。

9.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgG部分具有对EGFR的结合特异性并且所述单链Fv结构域同时具有对HER3的结合特异性。

10.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链中至少一个的所述C端缺失一个氨基酸残基。

11.根据权利要求10所述的双特异性四价抗体，其中所述氨基酸残基是赖氨酸。

12.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl-连接体连接能抵抗蛋白酶活性。

13.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链中至少一个包含在CH3结构域中的两个突变，其中所述两个突变回复成人CH3结构域中的通用残基。

14.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中轻链可变区中至少一个包含含有SEQ ID NO 72的氨基酸序列。

15.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中重链可变区中至少一个包含含有SEQ ID NO 77的氨基酸序列。

16.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述IgGl重链、连接体和单链Fv结构域具有包含SEQ ID NO 76的氨基酸序列。

17.根据权利要求1所述的双特异性四价抗体，其中所述κ轻链中至少一个包含含有SEQID NO 71的氨基酸序列。