[发明专利]马铃薯黑胫病菌的特异性引物、探针及其应用有效
申请号: | 202110472615.4 | 申请日: | 2021-04-29 |
公开(公告)号: | CN112961928B | 公开(公告)日: | 2022-11-25 |
发明(设计)人: | 苏振贺;郭庆港;马平;李社增;鹿秀云;董丽红;王培培;张晓云;赵卫松;曲远航 | 申请(专利权)人: | 河北省农林科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 | 代理人: | 尚文文 |
地址: | 071000 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 马铃薯 病菌 特异性 引物 探针 及其 应用 | ||
1.一种特异性引物和探针在检测马铃薯黑胫病菌方面的应用,其特征在于,所述特异性引物的核苷酸序列为:
SEQ ID NO.1: 5'-GCCGTTGAAACGACCATGAG-3',
SEQ ID NO.2: 5'-GGTATCAACGGTTTTGGCCG-3';
所述探针的核苷酸序列为:
SEQ ID NO.3: 5'- TATACGCCATGTAATCAGCA-3',其中,
所述马铃薯黑胫病菌为胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum)BL-4,其保藏编号为CGMCC.22021。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述探针的5’端标记荧光基团,所述探针的3’端标记淬灭基团。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述探针的5'端标记有FAM荧光染料,所述探针的3'端标记有淬灭基团MGB。
4.马铃薯黑胫病菌的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括利用权利要求1所述的特异性引物和探针进行PCR扩增的步骤,其中,所述马铃薯黑胫病菌为胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum)BL-4,其保藏编号为CGMCC.22021。
5.根据权利要求4所述的马铃薯黑胫病菌的检测方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系包括以下组分:Probe qPCR Mix 10 μL、引物2.0 μL、探针1.0 μL、模板1 μL,用灭菌ddH2O补足至20 μL。
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