[发明专利]微纳生物颗粒热泳检测装置及方法在审
申请号: | 202110473040.8 | 申请日: | 2021-04-29 |
公开(公告)号: | CN113188959A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 孙佳姝;邓瑾琦;刘超;田飞;赵帅 | 申请(专利权)人: | 国家纳米科学中心 |
主分类号: | G01N15/00 | 分类号: | G01N15/00 |
代理公司: | 北京市英智伟诚知识产权代理事务所(普通合伙) 11521 | 代理人: | 刘丹妮;姚望舒 |
地址: | 100190 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 颗粒 检测 装置 方法 | ||
1.一种微纳生物颗粒热泳检测装置,其特征在于,所述装置包括芯片和热泳体系;
其中,所述芯片包括自下而上依次设置的载玻片、微腔和蓝宝石片。
2.根据权利要求1所述的检测装置,其特征在于,所述芯片的微腔为圆柱形微腔;
优选地,所述圆柱形微腔的直径为2~2000mm,优选为10~200mm,最优选为70mm;和/或
所述圆柱形微腔高度为10~200μm,优选为50~120μm,最优选为80μm。
3.根据权利要求1或2所述的检测装置,其特征在于,所述热泳体系包括荧光显微镜、激光器和EMCCD。
4.一种微纳生物颗粒热泳检测方法,其特征在于,所述方法包括使用权利要求1至3中任一项所述的微纳生物颗粒热泳检测装置进行检测;
优选地,所述微纳生物颗粒选自以下一种或多种:病毒、细菌、细胞外囊泡、脂蛋白。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)将微纳生物颗粒与荧光标记物混合,得到荧光标记的微纳生物颗粒;优选地,所述微纳生物颗粒与荧光标记物混合后进一步包括孵育步骤;
(2)将步骤(1)中得到的荧光标记的微纳生物颗粒与PEG溶液混合得到待测溶液;
(3)将步骤(2)得到的待测溶液加入所述微纳生物颗粒热泳检测装置芯片的微腔内,盖上蓝宝石片,放置在荧光显微镜的载物台上;
(4)打开激光器照射芯片,汇聚微纳生物颗粒,汇聚前后使用EMCCD拍摄;
(5)计算汇聚前后的荧光强度值之差,得到微纳生物颗粒汇聚所得荧光强度值。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述荧光标记物选自以下一种或多种:小分子荧光染料、荧光核酸适体、荧光标记抗体;
优选地,所述小分子荧光染料为DiI。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述待测溶液中PEG的质量分数为6%以上,优选为6%~12%,最优选为9%。
8.根据权利要求5至7中任一项所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述激光照射波长为1000~100000nm,优选为1200~20000nm,最优选为1480nm。
9.根据权利要求5至8中任一项所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,荧光显微镜的物镜的放大倍数为5~100倍;
EMCCD的曝光时间为2~1000ms;和/或
EMCCD的增益为10~100。
10.一种微纳生物颗粒检测系统,其特征在于,所述微纳生物颗粒检测系统包括权利要求1至3中任一项所述的微纳生物颗粒热泳检测装置。
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