[发明专利]富含血小板血浆的制备方法有效
申请号: | 202110475526.5 | 申请日: | 2021-04-29 |
公开(公告)号: | CN113322232B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 薛卫巍;李勇;谢天仲;谢海涛 | 申请(专利权)人: | 广东先康达生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
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地址: | 523808 广东省东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 富含 血小板 血浆 制备 方法 | ||
本发明公开了一种富含血小板血浆的制备方法,包括如下步骤:用肝素钠采集管采集血液样品;将血液样品进行低速离心处理,收集上层液;对上层液降温处理;往降温处理后的上层液中加入浓缩分离液;对浓缩分离处理后的溶液进行高速离心处理,收集下层液,即得到富含血小板血浆。本发明制备方法,在低速离心和高速离心处理过程中,增加降温和浓缩分离处理,制得的富含血小板血浆的浓缩倍数可达5倍以上,且血小板之间不存在黏连结块的现象,适用于临床应用。
技术领域
本发明涉及医药领域,尤其涉及一种本发明涉及医药领域,尤其是涉及一种富含血小板血浆的制备方法。
背景技术
富血小板血浆(PRP)是全血经过离心分离得到的血小板浓缩物,其制备原理是利用血液中各种成分沉降速度不同,通过离心将血液分层。全血经低速离心可分为三层,上层是贫血小板血浆层(PPP)、中间为富血小板血浆层(PRP)、下层为红细胞层,取中间层可得到高度浓缩的含血小板血浆。
现有的PRP制备方法分为一次离心法和二次离心法。其中,一次离心法,是指对血液样品采用一次分离后,去除下层红细胞,获得上层液,即得富含血小板血浆;二次离心法,是指对血液样品采用一次分离后,获得上层液,再对上层液进行二次离心,去除上层液,保留下层液,即得到富含血小板血浆。前一种方法,操作简单、效率高,但获得的富含血小板血浆的浓缩能力小,不适合临床应用;后一种方法,虽然获得的富含血小板血浆的浓缩能力提升了,但浓缩倍数还是小,且血小板易于破坏及存在黏连结块现象,难以垂悬均匀。
总之,上述两种富血小板血浆制备方法,其PRP收率不高,一般在55%左右,即浓缩倍数小。因此,现有的PRP制备方法仍有待改进。
发明内容
有鉴于此,针对上面常用的分离方法存在的结块和收率低的问题,本发明目的在于提供一种高浓缩倍数、且血小板自体形态表现良好的富含血小板血浆的制备方法。
本发明的目的是采用如下技术方案实现:
一种富含血小板血浆的制备方法,包括如下步骤:
室温下,用肝素钠采血管采集的血液样品;
将采集管放入离心机中进行低速离心处理,并收集上层液置于离心管中;
对收集后的上层液降温处理,随后升至室温;
往降温处理后的上层液中加入浓缩分离液进行浓缩分离,得到混合液;
将浓缩分离处理后的所述混合液置于离心机中,经高速离心处理后,去除高速离心后离心管中的上层液,保留下层液,即得到富含血小板血浆。
一实施例中,所述低速离心处理时,离心力为80g~150g且离心时间为10~15分钟。
一实施例中,所述降温处理时,温度由室温下降到2~8℃且维持降温处理时间为25~35分钟。
一实施例中,所述浓缩分离液包括乙二胺四乙酸钠、枸橼酸、枸橼酸钠、磷酸二氢钠、葡萄糖、腺嘌呤和人血白蛋白。
一实施例中,按照每1000ml浓缩分离液总体积计算,该浓缩分离液中:乙二胺四乙酸钠1.82~2.52g、枸橼酸3.0~3.5g、枸橼酸钠25.93~27.1g、磷酸二氢钠1.80~2.42g、葡萄糖30.1~32.9g、腺嘌呤0.20~0.32g、人血白蛋白45~55ml、余量为无菌去离子水。
较好地,乙二胺四乙酸钠2.22g、枸橼酸3.27g、枸橼酸钠26.3g、磷酸二氢钠2.22g、葡萄糖31.9g、腺嘌呤0.275g、人血白蛋白50ml、余量为无菌去离子水。
一实施例中,所述高速离心处理时,离心力为800g~1500g、离心时间为5~10分钟。
本发明提供的富含血小板血浆的制备方法中,具有如下有点:
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