[发明专利]DNA折纸框架脂质体及其制备方法

权利要求书

1.一种DNA折纸框架脂质体，其特征在于：所述DNA折纸框架脂质体包括磷脂分子和DNA折纸框架，所述DNA折纸框架包括DNA圆环折纸和锚定在所述DNA圆环折纸上的脂化DNA，所述脂化DNA与所述磷脂分子结合，用于将所述磷脂分子固定在所述DNA折纸框架上。

2.根据权利要求1所述的DNA折纸框架脂质体，其特征在于：所述DNA圆环折纸的内侧设有DNA连接链，所述脂化DNA包括DNA单链，所述DNA单链与所述DNA连接链以互补的方式结合。

3.根据权利要求2所述的DNA折纸框架脂质体，其特征在于：所述脂化DNA包括连接在所述DNA单链上的马来酰亚胺脂质，所述磷脂分子以所述马来酰亚胺脂质作为成核点，并沿所述成核点向四周生长。

4.根据权利要求3所述的DNA折纸框架脂质体，其特征在于：所述DNA圆环折纸的内侧延伸出16条DNA连接链，每条所述DNA连接链均与1个脂化DNA连接，每个脂化DNA上的每条DNA单链均连接1个马来酰亚胺脂质，每个马来酰亚胺脂质均可以与多个所述磷脂分子结合。

5.一种DNA折纸框架脂质体的制备方法，应用于权利要求1～4中任一项所述的DNA折纸框架脂质体，其特征在于，包括以下步骤：

制备DNA圆环折纸；

制备脂化DNA；

将脂化DNA锚定在DNA圆环折纸上，得到DNA折纸框架；

将磷脂分子与DNA折纸框架组装，得到DNA折纸框架脂质体。

6.根据权利要求5所述的DNA折纸框架脂质体的制备方法，其特征在于，制备DNA圆环折纸的步骤具体为：将骨架链与订书钉链按比例混合均匀，在1×TAE-Mg²⁺溶液中进行聚合酶链式反应，得到DNA折纸溶液，使用1×反应缓冲溶液制备不同浓度的甘油梯度密度液，并将所述甘油梯度密度液置于离心管内，所述甘油梯度密度液的密度从上到下依次递增，将所述DNA折纸溶液置于所述甘油梯度密度液的顶层，纯化后得到DNA圆环折纸。

7.根据权利要求5所述的DNA折纸框架脂质体的制备方法，其特征在于，制备脂化DNA的步骤具体为：使用磷酸三乙酯溶液还原所述5’端修饰巯基的DNA单链，得到还原后的巯基DNA单链，在真空环境下，将所述还原后的巯基DNA单链与马来酰亚胺脂质混合均匀，使用1％辛基-β-D-葡萄糖苷溶液在27℃的条件下反应2小时并透析16小时，得到脂化DNA溶液，使用1×反应缓冲溶液稀释碘克沙醇得到不同浓度的碘克沙醇梯度密度液，将所述脂化DNA溶液置于所述碘克沙醇梯度密度液的底部，在4℃的条件下静置过夜后，纯化得到脂化DNA。

8.根据权利要求7所述的DNA折纸框架脂质体的制备方法，其特征在于：所述马来酰亚胺脂质的摩尔质量浓度至少为所述还原后的巯基DNA单链摩尔质量浓度的20倍，所述脂化DNA的摩尔质量浓度至少为所述DNA折纸框架摩尔质量浓度的160倍。

9.根据权利要求5所述的DNA折纸框架脂质体的制备方法，其特征在于，制备DNA折纸框架的步骤具体为：将所述DNA圆环折纸与所述脂化DNA混合均匀后，从37℃缓慢降温至27℃，反应8小时，得到DNA折纸框架。

10.根据权利要求5所述的DNA折纸框架脂质体的制备方法，其特征在于，制备DNA折纸框架脂质体的步骤具体为：将磷脂分子与所述DNA折纸框架混合均匀后，加入1％的辛基-β-D-葡萄糖苷溶液，在27℃的条件下反应2小时并透析16小时，得到DNA折纸框架脂质体溶液，使用1×TAE-Mg²⁺缓冲液稀释碘克沙醇得到不同浓度的碘克沙醇梯度密度液，并将所述碘克沙醇梯度密度液置于离心管内，所述碘克沙醇梯度密度液的密度从上到下依次递增，将所述DNA折纸框架脂质体溶液置于所述碘克沙醇梯度密度液的底部，纯化得到DNA折纸框架脂质体。