[发明专利]一种电化学适配体传感器的免校正定量测量方法

权利要求书

1.一种电化学适配体传感器的免校正定量测量方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)室温下制备结构转换式电化学适配体传感器，通过自组装将硫醇化的结构转换核酸适配体组装在温控金盘电极表面，得到温度可控的电化学适配体传感器；

(2)将步骤(1)得到的电化学适配体传感器作为工作电极，与参比电极、对电极一同放置于装有待测样品溶液的容器中，得到检测装置，并将所述检测装置浸入冰水浴，对所述电化学适配体传感器进行预校准；

所述预校准方法为：在待测样品溶液中添加不同浓度的靶标分子，在电极表面温度为第一温度和第二温度下采集方波伏安电流信号，并以两者的比率作为输出信号，记为α，建立靶标浓度和信号输出α的关系曲线；

(3)对步骤(2)得到的关系曲线，使用希尔公式(I)进行拟合，确定所述电化学适配体传感器的出厂参数；

(4)步骤(3)得到的出厂参数对相同条件下制备的同类型电化学适配体传感器通用，对于未校准的该类型传感器即可通过希尔公式变式(II)对待测样品进行定量检测；

步骤(3)中，所述希尔公式(I)如下所示：

其中，α表示第一温度和第二温度下方波伏安电流的比率，Target表示靶标分子，[Target]表示靶标分子的浓度，K_1/2为解离常数，r_min为α的最小值，r_max为α的最大值，n为希尔系数，K_1/2、r_min、r_max和n即为出厂参数；

步骤(4)中，所述希尔公式变式(II)如下所示：

其中，[Target]表示靶标分子的浓度，α为第一温度和第二温度下方波伏安电流的比率，r_min为α的最小值，r_max为α的最大值。

2.根据权利要求1所述的一种电化学适配体传感器的免校正定量测量方法，其特征在于，步骤(2)中，第一温度的取值范围为0～10℃，第二温度的取值范围为25～40℃。

3.根据权利要求2所述的一种电化学适配体传感器的免校正定量测量方法，其特征在于，通过外接的温控设备来控制电极表面温度分别为第一温度和第二温度。

4.根据权利要求1所述的一种电化学适配体传感器的免校正定量测量方法，其特征在于，步骤(1)中，所述核酸适配体为预先合成的、可与待测物质特异性结合且具有结构转换功能的适配体；适配体链的一端修饰有电化学活性物质，电化学活性物质包括亚甲基蓝或二茂铁；适配体的另一端修饰有二硫键，使用前通过还原剂还原为巯基。

5.根据权利要求1所述的一种电化学适配体传感器的免校正定量测量方法，其特征在于，步骤(1)中，所述金盘电极的电极面积范围为0.01～100mm²。