[发明专利]一种渗出性动物肺炎模型构建方法

说明书

本发明公开了一种渗出性动物肺炎模型构建方法，包括以下步骤：向动物腹腔注射脂多糖；次日，连续数日，每日鼻腔接种等量的肺炎克雷伯杆菌，建立动物肺炎模型。本渗出性肺炎模型的建立，通过在攻毒前，先腹腔注射低剂量的脂多糖，致使大鼠免疫力下降，以利于肺炎克雷伯杆菌在大鼠肺部的定殖，从而能够确保在十天之内获得渗出性肺炎模型，大大缩短造模周期，以利于为后期的预防和治疗研究提供模型基础。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种渗出性动物肺炎模型构建方法。

背景技术

渗出性肺炎是肺炎的一种，病理变化以肺泡腔大量的炎性渗出为主，并常伴有肺泡、肺间质及支气管的充血、出血等，是多种肺部疾病发生的病理基础。随着空气污染问题日益严峻，人类及动物肺部疾病日趋高发，渗出性肺炎作为大部分肺部疾病发病的基础，受到大量的关注，科学、简单、高效的制造渗出性肺炎动物模型可以加快人们对肺炎机理的认知，从而为预防和治疗的发展提供理论依据，渗出性肺炎造模方法成为众多学者研究的方向。

目前已知的肺炎克雷伯杆菌大鼠感染模型的建立方法多以长周期、间隔时间重复滴鼻感染及手术气管滴入、弥散为主，试验周期长，并且手术造模对环境、设备以及人员等条件要求高，难以大批量的造模动物。

发明内容

针对现有技术中肺炎动物模型建立周期长的问题，本发明提出一种能够快速构建渗出性动物肺炎模型的方法。

实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：

一种渗出性动物肺炎模型构建方法，包括以下步骤：

向动物腹腔注射脂多糖；

次日，连续数日，每日鼻腔接种等量的肺炎克雷伯杆菌，建立动物肺炎模型。

根据权利要求1所述的一种渗出性动物肺炎模型构建方法，其特征在于：所述动物选用SPF Wistar大鼠，所述SPF Wistar大鼠为6周龄、体重200±10g。

作为本发明的进一步改进，所述脂多糖的浓度为3.8-4.2mg/ml，注射量为45-55ul/100g。

作为本发明的进一步改进，所述脂多糖为从血清型为O55：B5的大肠杆菌中，用苯法提取而得，其内毒素水平不少于500000 EU/mg。

作为本发明的进一步改进，所述肺炎克雷伯杆菌在菌液中的浓度为0.8-1.2×107CFU/mL。

作为本发明的进一步改进，所述菌液的接种量为45-55ul/只。

作为本发明的进一步改进，所述鼻腔接种的方法是：采用手持移液器吸入定量菌液，逐滴滴入动物鼻腔周围，通过动物的自然吸气吸入肺部。

作为本发明的进一步改进，所述肺炎克雷伯杆菌的接种的天数为4.5-5.5日。

本发明的有益效果：本渗出性肺炎模型的建立，通过在攻毒前，先腹腔注射低剂量的脂多糖，致使大鼠免疫力下降，以利于肺炎克雷伯杆菌在大鼠肺部的定殖，从而能够确保在十天之内获得肺炎模型，大大缩短造模周期，以利于为后期的预防和治疗研究提供模型基础。

附图说明

图1为攻毒后大鼠临床表现统计数据，其中a为攻毒后大鼠体温的变化情况；b为攻毒后大鼠每分钟呼吸次数的变化情况；c为攻毒后大鼠七天增重变化；

图2为攻毒后，大鼠炎性指标测定数据统计，其中d为大鼠血项的变化情况；e为大鼠血清中IL-6表达量的变化情况；f为大鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β表达量的变化情况；

图3为攻毒后，剖检大鼠，肺部组织切片图。

具体实施方式