[发明专利]一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型及其制备方法

权利要求书

1.一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型，其特征在于：包括由无血清快速细胞冷冻液、细胞构成的细胞悬浮液以及浸泡在细胞悬浮液内的“海绵基”微流道结构，所述“海绵基”微流道结构用于模拟自然器官血管，内载海绵状的微观结构，由生物水凝胶经冷冻干燥制成。

2.如权利要求1所述的一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型，其特征在于：所述生物水凝胶由生物材料交联制成，生物材料为海藻酸钠、明胶、胶原或纤维蛋白，交联方法为钙离子交联法、酶交联法或超声交联法。

3.如权利要求1所述的一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型，其特征在于：所述的细胞悬浮液由无血清快速细胞冷冻液分散细胞，形成细胞悬浮液。

4.如权利要求1所述的一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型，其特征在于：所述的细胞为肝细胞、骨细胞、干细胞、永生化细胞、肿瘤细胞或原代肝细胞。

5.如权利要求1所述的一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型，其特征在于：所述的细胞密度为1×～2×10⁶Cells/ml。

6.如权利要求1所述的一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型，其特征在于：可长期保存的即用型冷冻活性组织模型长期存放于-80℃环境中，即用即解冻复苏活性，能够实现仿生活性组织的实验室间运输、商业化保存和无差别样本检测。

7.如权利要求1-6任一项所述的一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1、根据医学CT、核磁共振技术重构器官微观血管结构的三维计算机模型，将三维计算机模型以IGES格式导入计算机辅助设计软件进行实体化仿生设计，构建出具有微观流道结构的仿生模型；

S2、根据所述具有微观流道结构的仿生模型设计仿生模型模具图纸，其中，微流道直径在0.1～1.5mm之间；

将仿生模型模具图纸以STL格式导出，以树脂为材料利用光固化打印技术制备仿生模型模具；

S3、向制备所得的仿生模型模具内灌注液体硅橡胶，经固化得到硅橡胶仿生模型；

S4、向所述的硅橡胶仿生模型中灌注水，经过-20℃冷冻处理得到仿生模型的冰制模具；

S5、配制生物材料溶液，将生物材料溶液灌注到所述的冰制模具内，经交联、冷冻处理形成固态生物材料仿生模型；

S6、将所述固态生物材料仿生模型放入冷冻干燥机，经冷冻干燥处理24小时后，得到“海绵基”微流道结构模型；

S7、在无血清快速细胞冻存液中加入细胞制备细胞悬浮液；

S8、将所述的“海绵基”微流道结构模型泡入所述的细胞悬浮液中，并将其放置到-80℃环境中长期保存，即得到可长期保存的即用型冷冻活性组织模型。

8.如权利要求7所述的一种可长期保存的即用型冷冻活性组织模型的制备方法，其特征在于：使用时，将所述的可长期保存的即用型冷冻活性组织模型放置于37℃的培养液中，并放于细胞培养箱中，4小时后更换培养液，即实现了活性仿生组织模型。