[发明专利]siglec-5、基因表达拮抗剂或蛋白活性拮抗剂的应用

说明书

本发明涉及siglec‑5、siglec‑5基因表达拮抗剂、siglec‑5蛋白活性拮抗剂在调节细胞对脂质摄取中的应用；还涉及一种调节细胞对脂质摄取的方法，包括改变所述细胞中siglec‑5表达量或活性的步骤；还涉及siglec‑5基因表达拮抗剂或siglec‑5蛋白活性拮抗剂在制备AS治疗药物中的应用。本发明发现siglec‑5作为oxLDL新型受体在内皮细胞中介导oxLDL穿胞和在巨噬细胞中介导oxLDL的摄取，从而影响巨噬泡沫细胞的形成具有重要作用。根据该发现，通过敲除或敲降siglec‑5表达，或者封闭或抑制内皮细胞和巨噬细胞膜上siglec‑5的功能，获得一种治疗或预防动脉粥样硬化发生发展的新药物和方法。

技术领域

本发明涉及AS发病机理与防治领域，更特别地，涉及siglec-5、siglec-5基因表达拮抗剂或siglec-5蛋白活性拮抗剂在调剂细胞对脂质摄取中的应用，以及siglec-5基因表达拮抗剂或siglec-5蛋白活性拮抗剂在治疗AS中的应用。

背景技术

动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是血管壁的一种慢性非可控性炎症性疾病，是心脑血管疾病的共同病理基础。AS发病机制复杂，至今仍未完全阐明。近年来，“滞留-反应”学说收到广泛关注，该学说认为，低密度脂蛋白尤其是是氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)在血管内皮下沉积滞留AS发生发展的关键因，与AS的形成直接相关，oxLDL是动脉粥样斑块的核心组成部分。

Siglec-5属于唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素(siglecs)受体超家族蛋白质的一员，有四个细胞外免疫球蛋白样结构域和两个胞内酪氨酸信号基序。已有研究报道siglec-5主要表达在人类单核细胞、中性粒细胞、巨噬细胞以及树突状细胞膜上，也可分泌至细胞外，主要参与天然免疫反应的调节。

发明内容

我们在研究中发现，siglec-5可与oxLDL相互作用，介导oxLDL穿胞，并且其在oxLDL的致动脉粥样硬化机制中具有重要作用，并发现siglec-5拮抗剂具有降低细胞对oxLDL的摄取和穿胞作用的功能。

基于以上发现，本发明提供了siglec-5、siglec-5基因表达拮抗剂或siglec-5蛋白活性拮抗剂在调节细胞对脂质摄取中的应用。这种应用可为治疗应用或非治疗应用。

本发明还提供了一种调节细胞对脂质摄取的方法，包括改变所述细胞中siglec-5表达量或活性的步骤。该方法可为治疗方法或非治疗性方法。

在一个具体实施方案中，通过向所述细胞中导入siglec-5的超表达框，或siglec-5基因表达拮抗剂，或者用siglec-5蛋白活性拮抗剂孵育所述细胞，或其组合，来改变所述细胞中siglec-5表达量或活性。

在一个具体实施方案中，所述siglec-5基因表达拮抗剂为敲除或敲降siglec-5表达的核酸构建体。例如，可为例如可敲降siglec-5的siRNA、miRNA，也可为CRISPR基因编辑系统，只需要能够敲除或敲降siglec-5的表达即可。这样的核酸构建体，可搭载在表达载体上，用于转入相应的细胞中

在一个具体实施方案中，所述siglec-5蛋白活性拮抗剂为抗siglec-5抗体或可溶性siglec-5蛋白。所述抗siglec-5抗体可为单克隆抗体、多克隆抗体、纳米抗体等，或其组合。所述可溶性siglec-5蛋白可为截去跨膜区段的siglec-5蛋白，也可为截短蛋白的部分区段，只需要包含与oxLDL结合的受体区域即可。

在一个具体实施方案中，所述细胞为血管上皮细胞或巨噬细胞。

在一个具体实施方案中，所述脂质为oxLDL。

本发明还提供了siglec-5基因表达拮抗剂或siglec-5蛋白活性拮抗剂在制备AS治疗药物中的应用。

在一个具体实施方案中，所述siglec-5基因表达拮抗剂为敲除或敲降siglec-5表达的核酸构建体。