[发明专利]一种高亲和力抗狂犬病病毒的全人源单克隆抗体及其用途

说明书

本发明涉及一种高亲和力抗狂犬病病毒的全人源单克隆抗体，属于生物免疫学领域。所述的单克隆抗体或其结合片段的重链可变区具有具有如SEQ IDNO:11、13、15、17和19任一项所示的重链可变区的核苷酸序列；和如SEQ IDNO:12、14、16、18和20任一项所示的轻链可变区的核苷酸序列。本发明还提供该抗体的编码基因、表达载体、用途和组合物。狂犬病毒糖蛋白(Glycoprotein，GP)是该病毒表面唯一的保护性抗原蛋白。本发明成功构建了狂犬病毒特异性抗原蛋白的原核表达载体，并利用大肠杆菌原核系统对其进行了表达和纯化，该抗原蛋白已成功用于抗体的筛选。并且已利用我们的筛选平台成功地筛选到了5株针对狂犬病毒GP片段的特异性全人源单克隆抗体序列，为临床上开发治疗狂犬病的抗体药物奠定了基础。

技术领域

本发明涉及生物免疫学领域，具体地说，涉及一种高亲和力抗狂犬病病毒的全人源单克隆抗体及其用途。

背景技术

狂犬病(rabies)主要是由狂犬病毒(Rabies virus，RABV)引起的严重侵害中枢神经系统的急性传染病，在我国传染病分类中为乙类传染病。世界上最早关于狂犬病的资料记载始于4300年前的美索不达米亚，我国关于狂犬病的文字记载最早出现在距今约2500年的《左传》中。许多研究认为狂犬病起源于亚洲或欧洲，18世纪或由欧洲传入西半球，19世首次在南美洲发现。目前，狂犬病存在于除南极洲外的其他各个大洲，覆盖100多个国家。该病毒主要通过破损的皮肤、黏膜或呼吸道感染机体，唾液是其主要传染途径之一。几乎所有的哺乳类温热动物，如浣熊、臭鼬、蝙蝠、狐狸都是RABV宿主，主要传染源是患病或携带病毒的犬类^[7]。大多数人类狂犬病主要是被患病动物咬伤所导致，部分患者是被抓挠或伤口、黏膜等污染所引起，鲜有因移植该病患者捐赠的器官或组织而发病的案例。RABV主要作用于中枢神经系统，大量存在于易感动物的脑脊液。人狂犬病主要表现为急性进展性脑脊髓炎，发病时通常有两种形式：以间接性的兴奋及幻觉伴随的狂躁型狂犬病，同时伴有恐风、恐水、恐声等症状，患者通常在7天内死亡，此外还有以肌无力为特征的麻痹型狂犬病，通常14天内导致死亡。该病潜伏期一般为3周至3个月，10天以内或长达1年及以上的报道极为少见^[9]。

据世界卫生组织(World health organization，WHO)统计报道，全球每年有6万多人因狂犬病死亡，其中绝大多数发生在亚非洲地区，平均每10min有1人死亡，其中50％发生于15岁以下的孩童。此外，每年约有2千万只狗被无辜捕杀，其中因狂犬病被捕杀的达38只/min。中国狂犬病死亡率位于亚洲第二，仅次于印度，死亡人数高居我国传染病死亡数的前三位。中国每年用于狂犬病防疫的资金超过100亿元，而实际效果却差强人意。全球每年有1500多万人接受狂犬病暴露后预防接种，造成经济损失高达40亿美元。