[发明专利]一种诊断标志物及其在COVID-19诊断及冠状病毒既往感染检测中的应用

说明书

本发明公开一种诊断标志物及在COVID‑19诊断及冠状病毒既往感染检测中的应用。所述诊断标志物包括肽段COVID19‑V002，所述肽段的氨基酸序列为：包含PSKRSFIEDLLF中5个及5个以上连续氨基酸的序列；或所述肽段COVID19‑V002的氨基酸序列为：包含PSKRSFIEDLLF中1个到几个氨基酸的取代或/和缺失或/和添加所形成的序列。基于本发明的诊断标志物应用间接法定性检测人血清中抗肽段COVID19‑V002的IgG抗体的水平。通过本发明所建立的检测试剂盒，可作为新型冠状病毒肺炎诊断以及新型冠状肺炎病毒灭活疫苗保护效果评估的一种辅助手段。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种诊断标志物及其在COVID-19诊断及冠状病毒既往感染检测中的应用，尤其涉及一种肽段COVID19-V002及其衍生物在诊断 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)试剂盒中的应用。

背景技术

SARS-CoV-2为一种新型的β属冠状病毒新毒株，可跨越物种屏障感染人类，可通过密切接触、呼吸道飞沫、高浓度气溶胶传播，引起以肺部病变为主的传染病，也可诱 发包括神经系统和消化系统在内的全身性损伤，严重者可导致死亡(Lancet.2020Feb 15；395(10223):514-523)。基于目前尚无针对SARS-CoV-2的有效药物，以及疫苗尚处 于临床验证阶段的现状，准确的早期诊断、及时的隔离治疗是控制疫情的关键。

截至2020年3月27日，国家药监局已经应急批准了23个新型冠状病毒检测产品(其中新冠病毒核酸检测试剂15个，抗体检测试剂8个)以满足疫情防控用检测试剂 的需求(http://www.nmpa.gov.cn/)。“呼吸道标本或血液标本实时荧光RT-PCR检测新 型冠状病毒核酸阳性或病毒基因测序与已知的新型冠状病毒高度同源”是新型冠状病毒 肺炎(COVID-19)诊断的金标准(http://www.nhc.gov.cn/wjw/)。核酸检测虽然具备灵敏 度高，特异性强的优势，但结果易受取样部位，样本质量，实验操作的限制而导致与COVID-19影像学表现不一致亦或“假阴性”，不仅如此，核酸检测对实验环境及操作 人员的要求较高，耗时较长，检测人员感染风险高。

作为免疫系统抵抗病毒的重要效应分子，血液中的特异性抗体成为诊断病毒感染的 另一依据。国家卫生健康委员会在2020年3月3日发布的《新型冠状病毒诊疗方案(试 行第七版)》中，正式在原有核酸检测和测序基础上增加“血清学检测”作为依据，即 “新型冠状病毒特异性IgM抗体和IgG抗体阳性”或“新型冠状病毒特异性IgG抗体 由阴性转为阳性或恢复期较急性期4倍及以上升高”也可确诊 (http://www.nhc.gov.cn/wjw/)。新冠病毒抗体检测试剂盒主要包括IgG抗体和IgM抗 体检测。通常情况下，免疫系统产生IgM抗体较早，感染后一周内出现，通常预示急性 感染，可利用该抗体检测阳性作为早期感染的指标；IgG则产生较晚，但维持时间相对 更长，可利用该抗体检测阳性作为感染和既往感染的依据(Clinical and Vaccine Immunology,2004,11(4):665-668)。通过胶体金免疫层析法或磁微粒化学发光法找到疑 似患者血清样本中的特异性抵抗病毒的抗体，从而协助判断患者的感染情况，此即为新 冠病毒抗体检测试剂盒的原理。抗体检测只需采取患者极少量血样，且对实验环境及检 测人员要求没有核酸检测苛刻，操作简易且时间短，在提高检测效率的同时也能很大程 度地降低检测人员的感染风险，与核酸检测优势互补，可降低“假阴性”率，是一种高 效有保障的辅助诊断手段，更为后续基层检测、居家检测提供一种方便可靠的筛查手段。