[发明专利]一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒。本发明提供了引物探针组，由上游引物F、下游引物R和探针P组成；上游引物F为序列表的序列1所示的单链DNA分子，下游引物R为序列表的序列2所示的单链DNA分子；探针P如序列表的序列3所示，且5’末端标记荧光基团，3’末端标记淬灭基团。本发明还保护所述引物探针组在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c)：(a)鉴定或辅助鉴定Beilong病毒；(b)检测待测样本是否感染了Beilong病毒。(c)检测待测样本是否污染了Beilong病毒。本发明可广泛应用于Beilong病毒在临床和实验室中的检测。

技术领域

本发明属生物检测技术领域，涉及一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒，包括特异性引物对和TaqMan荧光探针，可以实现对生物样本中Beilong病毒的检测。

背景技术

2003年，从大鼠肾系膜细胞系中分离出来一种新的病毒，命名为Beilong病毒(Beilong virus，BeiV)。Beilong病毒隶属副粘病毒科(Paramyxoviridae)，杰龙病毒属(Jeilongvirus)，为负链RNA病毒，基因组大小约19212nt，基因组结构为3'-N-P/V/C-M-F-SH-TM-G-L-5'。2009年香港地区报道的分子流行病学调查结果证实，Beilong病毒存在于褐家鼠和黑家鼠中。qRT-PCR技术具有快速、高灵敏性、高特异性和重复性高等特点，在病原体检测方面得以广泛应用。目前对Beilong病毒的鉴定主要依靠普通PCR技术，尚无基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒。

本发明首先提供了引物探针组，由上游引物F、下游引物R和探针P组成；

上游引物F为序列表的序列1所示的单链DNA分子，下游引物R为序列表的序列2所示的单链DNA分子；探针P如序列表的序列3所示，且5’末端标记荧光基团，3’末端标记淬灭基团。探针P为单链DNA分子。

所述探针P中，5’末端标记FAM荧光基团，3’末端标记MGB淬灭基团。

本发明还保护所述引物探针组在制备试剂盒中的应用；

所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c)：

(a)鉴定或辅助鉴定Beilong病毒；

(b)检测待测样本是否感染了Beilong病毒。

(c)检测待测样本是否污染了Beilong病毒。

本发明还保护一种试剂盒，包括所述引物探针组；

所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c)：

(a)鉴定或辅助鉴定Beilong病毒；

(b)检测待测样本是否感染了Beilong病毒。

(c)检测待测样本是否污染了Beilong病毒。

所述试剂盒具体包括如下组件：

(1)2×One Step RT-PCR Buffer；

(2)RT-PCR酶混合液；

(3)所述上游引物F；

(4)所述下游引物R；

(5)所述探针P；

(6)阳性对照：pUC57-BeiV质粒；

(7)阴性对照：pUC57质粒；