[发明专利]一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒在审
申请号: | 202110499489.1 | 申请日: | 2021-05-07 |
公开(公告)号: | CN115305294A | 公开(公告)日: | 2022-11-08 |
发明(设计)人: | 张小爱;刘玮;陈津津;丁恒 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 何叶喧 |
地址: | 100850 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 taqman 探针 beilong 病毒 检测 试剂盒 | ||
本发明公开了一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒。本发明提供了引物探针组,由上游引物F、下游引物R和探针P组成;上游引物F为序列表的序列1所示的单链DNA分子,下游引物R为序列表的序列2所示的单链DNA分子;探针P如序列表的序列3所示,且5’末端标记荧光基团,3’末端标记淬灭基团。本发明还保护所述引物探针组在制备试剂盒中的应用;所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c):(a)鉴定或辅助鉴定Beilong病毒;(b)检测待测样本是否感染了Beilong病毒。(c)检测待测样本是否污染了Beilong病毒。本发明可广泛应用于Beilong病毒在临床和实验室中的检测。
技术领域
本发明属生物检测技术领域,涉及一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒,包括特异性引物对和TaqMan荧光探针,可以实现对生物样本中Beilong病毒的检测。
背景技术
2003年,从大鼠肾系膜细胞系中分离出来一种新的病毒,命名为Beilong病毒(Beilong virus,BeiV)。Beilong病毒隶属副粘病毒科(Paramyxoviridae),杰龙病毒属(Jeilongvirus),为负链RNA病毒,基因组大小约19212nt,基因组结构为3'-N-P/V/C-M-F-SH-TM-G-L-5'。2009年香港地区报道的分子流行病学调查结果证实,Beilong病毒存在于褐家鼠和黑家鼠中。qRT-PCR技术具有快速、高灵敏性、高特异性和重复性高等特点,在病原体检测方面得以广泛应用。目前对Beilong病毒的鉴定主要依靠普通PCR技术,尚无基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种基于TaqMan探针法的Beilong病毒检测试剂盒。
本发明首先提供了引物探针组,由上游引物F、下游引物R和探针P组成;
上游引物F为序列表的序列1所示的单链DNA分子,下游引物R为序列表的序列2所示的单链DNA分子;探针P如序列表的序列3所示,且5’末端标记荧光基团,3’末端标记淬灭基团。探针P为单链DNA分子。
所述探针P中,5’末端标记FAM荧光基团,3’末端标记MGB淬灭基团。
本发明还保护所述引物探针组在制备试剂盒中的应用;
所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c):
(a)鉴定或辅助鉴定Beilong病毒;
(b)检测待测样本是否感染了Beilong病毒。
(c)检测待测样本是否污染了Beilong病毒。
本发明还保护一种试剂盒,包括所述引物探针组;
所述试剂盒的功能为如下(a)或(b)或(c):
(a)鉴定或辅助鉴定Beilong病毒;
(b)检测待测样本是否感染了Beilong病毒。
(c)检测待测样本是否污染了Beilong病毒。
所述试剂盒具体包括如下组件:
(1)2×One Step RT-PCR Buffer;
(2)RT-PCR酶混合液;
(3)所述上游引物F;
(4)所述下游引物R;
(5)所述探针P;
(6)阳性对照:pUC57-BeiV质粒;
(7)阴性对照:pUC57质粒;
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